Question

14．乙草胺是除草劑中常見的化學(xué)成分，在土壤和水體中存在時(shí)間長，難以降解．請回答下列問題：
（1）實(shí)驗(yàn)小組欲從土壤中獲取乙草胺降解菌，需將土壤樣品置于以乙草胺為唯一碳源的培養(yǎng)基中進(jìn)行富集培養(yǎng)．
（2）該實(shí)驗(yàn)小組選取乙草胺濃度為800mg/L的富集液進(jìn)行系列稀釋，分別取10³、10⁴和10⁵倍數(shù)的稀釋液0.1mL涂布于培養(yǎng)基上，每個(gè)稀釋倍數(shù)涂布三個(gè)平板，各平板的菌落數(shù)分別為（286、298、297），（35、33、31），（36、7、2）．
①不適合用于計(jì)數(shù)的為10⁵倍數(shù)的稀釋液，用另外兩組稀釋倍數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)得到的細(xì)菌數(shù)不一致的原因可能是稀釋倍數(shù)為10³時(shí)，更多的菌落連在一起最終形成單菌落，導(dǎo)致結(jié)果小于稀釋倍數(shù)為10⁴組．
②在稀釋倍數(shù)為10⁴培養(yǎng)基中，則每毫升富集液中乙草胺降解菌數(shù)量是3.3×10⁶．
③某同學(xué)認(rèn)為為了防止雜菌的污染，可在培養(yǎng)基中加入青霉素，你覺得該同學(xué)的說法是否確？不正確，理由是青霉素抑制雜菌繁殖的同時(shí)，也會抑制目的菌的繁殖．
（3）實(shí)驗(yàn)小組從土壤中篩選出兩株乙草胺降解菌D₁和D₂，溫度對兩株降解菌的生長的影響如圖所示．對溫度適應(yīng)范圍更廣的是菌株D1，溫度會影響菌株的生長狀況的原因是溫度會影響與菌株生長代謝有關(guān)酶的活性．

Answer 1

分析 1、兩種純化細(xì)菌的方法的比較

	優(yōu)點(diǎn)	缺點(diǎn)	適用范圍
平板劃 線分離法	可以觀察菌落特征，對混合菌進(jìn)行分離	不能計(jì)數(shù)	適用于好氧菌
稀釋涂布 平板法	可以計(jì)數(shù)，可以觀察菌落特征	吸收量較少，較麻煩，平板不干燥效果不好，容易蔓延	適用于厭氧，兼性厭氧

2、檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)，可以看出采用的計(jì)數(shù)方法是稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)．用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)時(shí)，在每一個(gè)梯度濃度內(nèi)，至少要涂布3個(gè)平板，選擇菌落數(shù)在30～300的進(jìn)行記數(shù)，求其平均值，再通過計(jì)算得出土壤中細(xì)菌總數(shù)．

解答 解：（1）分析題意可知，實(shí)驗(yàn)小組欲從土壤中獲取乙草胺降解菌，因此需要利用選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基該降解菌，即將土壤樣品置于以乙草胺為唯一碳源的培養(yǎng)基中進(jìn)行富集培養(yǎng)．
（2）該實(shí)驗(yàn)小組選取乙草胺濃度為800mg/L的富集液進(jìn)行系列稀釋，分別取10³、10⁴和10⁵倍數(shù)的稀釋液0.1mL涂布于培養(yǎng)基上，每個(gè)稀釋倍數(shù)涂布三個(gè)平板，各平板的菌落數(shù)分別為（286、298、297），（35、33、31），（36、7、2）．
①用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)時(shí)，在每一個(gè)梯度濃度內(nèi)，至少要涂布3個(gè)平板，選擇菌落數(shù)在30～300的進(jìn)行記數(shù)，求其平均值，因此10⁵倍數(shù)的稀釋液不適合用于計(jì)數(shù)；稀釋倍數(shù)為10³時(shí)，更多的菌落連在一起最終形成單菌落，導(dǎo)致結(jié)果小于稀釋倍數(shù)為10⁴組，因此用另外兩組稀釋倍數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)得到的細(xì)菌數(shù)不一致．
②在稀釋倍數(shù)為10⁴培養(yǎng)基中，則每毫升富集液中乙草胺降解菌數(shù)量=（35+33+31）÷3÷0.1×10⁴=3.3×10⁶．
③青霉素抑制雜菌繁殖的同時(shí)，也會抑制目的菌的繁殖，因此該同學(xué)說法錯(cuò)誤．
（3）分析曲線圖可以看出，對溫度適應(yīng)范圍更廣的是菌株 D1，溫度會影響菌株的生長狀況的原因是溫度會影響與菌株生長代謝有關(guān)酶的活性．
故答案為：
（1）乙草胺
①10⁵ 稀釋倍數(shù)為10³時(shí)，更多的菌落連在一起最終形成單菌落，導(dǎo)致結(jié)果小于稀釋倍數(shù)為10⁴組
②3.3×10⁶
③不正確    青霉素抑制雜菌繁殖的同時(shí)，也會抑制目的菌的繁殖
（2）D1      溫度會影響與菌株生長代謝有關(guān)酶的活性

點(diǎn)評 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記培養(yǎng)基的成分、種類及功能；識記接種微生物常用的兩種方法及注意事項(xiàng)，掌握微生物計(jì)數(shù)的方法，屬于考綱識記和理解層次的考查．