Question

【題目】乳酸鏈球菌素(Nisin)是…種比較安全的生物型防腐劑，在人體的消化道內(nèi)可被蛋白酶降解，并不會(huì)像抗生素那樣改變腸道正常菌群，因此應(yīng)用比較廣泛。某興趣小組擬驗(yàn)證Nisin對(duì)小鼠腸道菌群沒(méi)有影響，進(jìn)行了以下實(shí)驗(yàn)。

(1)實(shí)驗(yàn)步驟：

①選取狀況良好、年齡和體重近似的小鼠20只，隨機(jī)均分為A、B兩組；

②A組小鼠用含1.0%Nisin的食物連續(xù)飼喂12周；B組小鼠用____連續(xù)飼喂12周作為對(duì)照，其他情況相同；

③搜集A、B組小鼠糞便制成懸浮液分別涂布于____上（填下列選項(xiàng)前的字母）；

a．全營(yíng)養(yǎng)液體培養(yǎng)基
b．以Nisin為碳源的液體培養(yǎng)基

c．全營(yíng)養(yǎng)固體培養(yǎng)基
d．以Nisin為碳源的固體培養(yǎng)基

④接種后置于____（填“有氧”或“無(wú)氧”）條件下培養(yǎng)，通過(guò)觀察____，以初步鑒定小鼠消化道中的微生物類群；

⑤統(tǒng)計(jì)比較兩組微生物類群的種類和數(shù)量，以驗(yàn)證結(jié)論。

(2)請(qǐng)根據(jù)以上步驟回答下列問(wèn)題：

①在制作培養(yǎng)基時(shí)要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH的要求，調(diào)pH應(yīng)在高壓蒸汽滅菌之 ____ （填“前”或“后”）。

②若菌群中含有大腸桿菌，可在培養(yǎng)基中添加____制成鑒別培養(yǎng)基，可根據(jù)培養(yǎng)基中____色菌落的數(shù)目，計(jì)算出腸道中大腸桿菌的數(shù)量。除上述計(jì)數(shù)法外，還可以利用___ 在顯微鏡下直接觀察統(tǒng)計(jì)菌體的數(shù)量。

Answer 1

【答案】 用等量不含1.0% Nisin的同種食物 c 無(wú)氧 菌落的特征（大小、顏色、形狀和隆起程度等方面） 前 伊紅美藍(lán) 黑 血細(xì)胞計(jì)數(shù)板

【解析】試題分析：探究實(shí)驗(yàn)需要遵循對(duì)照原則和單一變量原則。該實(shí)驗(yàn)的目的是探究乳酸鏈球菌素對(duì)小鼠腸道菌群的影響，因此可用含乳酸鏈球菌素的食物連續(xù)飼喂甲組小鼠12周（實(shí)驗(yàn)組），用含有等量的經(jīng)過(guò)滅菌的乳酸鏈球菌素的相同食物連續(xù)飼喂乙組小鼠12周（對(duì)照組），通過(guò)觀察菌落的特征來(lái)統(tǒng)計(jì)比較微生物的數(shù)量及比例。

（1）實(shí)驗(yàn)步驟：
①選取狀況良好、年齡和體重近似的小鼠20只，隨機(jī)均分為A、B兩組；
②A組小鼠用含1.0%Nisin的食物連續(xù)飼喂12周；B組小鼠用用等量不含1.0% Nisin的同種食物連續(xù)飼喂12周作為對(duì)照，其他情況相同；

③該實(shí)驗(yàn)的目的是探究Nisin對(duì)小鼠腸道菌群的影響，而不是篩選出某種微生物，因此搜集A和B組（實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組）小鼠糞便制成懸浮液涂布于全營(yíng)養(yǎng)的固體培養(yǎng)基上，故選c。
④腸道菌群生活在缺氧的環(huán)境中，因此接種后應(yīng)該置于無(wú)氧條件下培養(yǎng)，通過(guò)觀察菌落的特征以初步鑒定小鼠消化道中的微生物類群。

⑤統(tǒng)計(jì)比較微生物的數(shù)量及比例，分析得出結(jié)論。
（2）①制備培養(yǎng)基的步驟為：計(jì)算、稱量、融合、調(diào)pH、滅菌和倒平板，即調(diào)pH應(yīng)在高壓蒸汽滅菌之前。

②伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌，因此可在培養(yǎng)基中添加伊紅-美藍(lán)制成鑒別培養(yǎng)基，可根據(jù)培養(yǎng)基中黑色菌落的數(shù)目，計(jì)算出腸道中大腸桿菌的數(shù)量。此外還可以利用血球計(jì)數(shù)板在顯微鏡下直接觀察統(tǒng)計(jì)菌體的數(shù)量。