Question

海洋中的發(fā)光細(xì)菌具獨(dú)特的生理特性，可作為環(huán)境監(jiān)測(cè)的指標(biāo)生物。

I.（1）使用              法（答二種），可在固體培養(yǎng)基上獲得單菌落，純化發(fā)光菌株。

（2）細(xì)菌這類微生物在基因工程中有重要應(yīng)用，試列舉其中一項(xiàng)。

II．現(xiàn)利用發(fā)光細(xì)菌對(duì)海水重金屬污染程度進(jìn)行生物毒性監(jiān)測(cè)，請(qǐng)完善下列實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)并回答問(wèn)題：

實(shí)驗(yàn)原理：細(xì)菌代謝正常時(shí)，發(fā)光強(qiáng)度穩(wěn)定；當(dāng)重金屬影響到其代謝時(shí)，發(fā)光會(huì)受到抑制，抑制程度用抑光率（發(fā)光被抑制的百分率）表示。

實(shí)驗(yàn)材料：發(fā)光菌懸液、可能受重金屬污染的待測(cè)海水水樣、3%NaCl溶液、熒光分光光度計(jì)（用于測(cè)定細(xì)菌發(fā)光強(qiáng)度）、試管等。

（1）實(shí)驗(yàn)步驟：按下表配制待測(cè)海水樣品稀釋液。

組   別	1	2	3	4	5
3%NaCl溶（mL）		4.74	4.49	4.24	3.99
海水樣品（mL）		0.25	0.50	0.75	1.00
發(fā)光菌懸液（mL）		0.01	0.01	0.01	0.01
混合液中海水濃度（%）		0.05	0.10	0.15	0.20

請(qǐng)完善實(shí)驗(yàn)步驟：

①1號(hào)試管中應(yīng)加入：3％NaCl溶液、海水樣品、發(fā)光菌懸液分別為           mL（3分）。

②各試管靜置15min后，                                                     。

（2）計(jì)算相對(duì)抑光率：按照公式T％=                           計(jì)算各組相對(duì)抑光率。

（3）如果測(cè)得上述各組相對(duì)抑光率如下：

組別	1	2	3	4	5
相對(duì)抑光率（%）	0	6	13	17	23

①請(qǐng)繪制海水濃度對(duì)相對(duì)抑光率影響的曲線（3分）。

②根據(jù)結(jié)果可以判斷待測(cè)海水樣品                                       。

 

Answer 1

【答案】

I.（1）平板劃線法、稀釋涂布平板法；  

（2）提供工具酶、提供目的基因、提供目的基因的載體、作為受體細(xì)胞、提供用于發(fā)酵的工程菌（答對(duì)其中一項(xiàng)即可）。

II.（1）①4.99、0、0.01（每項(xiàng)1分，共3分） ②利用熒光分光光度計(jì)測(cè)定各試管發(fā)光強(qiáng)度

（2）（對(duì)照組發(fā)光強(qiáng)度－實(shí)驗(yàn)組發(fā)光強(qiáng)度）/對(duì)照組發(fā)光強(qiáng)度×100%

（3）①下圖（3分）；②受到重金屬污染

【解析】

試題分析：I.要在培養(yǎng)基中看到菌落，所以應(yīng)是固定培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法； 細(xì)菌在基因工程中可以提供工具酶、提供目的基因、提供目的基因的載體、作為受體細(xì)胞、提供用于發(fā)酵的工程菌等；II.由2345組可知3％NaCl溶液、海水樣品、發(fā)光菌懸液加在一起是10ml，海水樣品一每組0.25遞增，發(fā)光菌懸液0.01ml不變，所以1號(hào)試管中應(yīng)加入：3％NaCl溶液、海水樣品、發(fā)光菌懸液分別為4.99 mL、0 mL、0.01mL；一段時(shí)間后利用熒光分光光度計(jì)測(cè)定各試管發(fā)光強(qiáng)度，計(jì)算其相對(duì)抑光率。1組沒(méi)有加入海水樣品，則其為空白對(duì)照，抑光率=（對(duì)照組發(fā)光強(qiáng)度－實(shí)驗(yàn)組發(fā)光強(qiáng)度）/對(duì)照組發(fā)光強(qiáng)度×100%，通過(guò)計(jì)算抑光率繪制曲線，發(fā)現(xiàn)當(dāng)混合液中海水濃度為1時(shí)計(jì)算，抑光率是120%，則為重度污染。

考點(diǎn)：本題考查了微生物的培養(yǎng)、實(shí)驗(yàn)探究的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，具有對(duì)一些生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行初步探究、并能對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和結(jié)果進(jìn)行解釋、分析和處理的能力。