Question

【題目】【生物一選修1生物技術(shù)實(shí)踐】某同學(xué)要分離土壤中能分解尿素的細(xì)菌，并統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中活菌數(shù)目，培養(yǎng)基配方如下。將各種物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1 000 mL，再經(jīng)高溫滅菌，制成固體培養(yǎng)基備用。

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO47H2O	蛋白胨	葡萄糖	尿素	瓊脂
1．4 g	2．1 g	0．2 g	1．0 g	10．0 g	1．0 g	15．0 g

（1）根據(jù)培養(yǎng)基的成分判斷，該同學(xué)能否分離出土壤中分解尿素的細(xì)菌？________（填“能”或“不能”），原因是_________________。

（2）培養(yǎng)基用________方法滅菌，培養(yǎng)皿用________方法滅菌，待培養(yǎng)基冷卻到________℃（填“20”、“30”、“40”或“50”）左右時(shí)，在________附近倒平板，等平板冷卻凝固后，將平板倒過(guò)來(lái)放置，可以防止________，以免造成污染。

（3）要統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中活菌數(shù)目，宜采用________法接種，根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計(jì)平板上的________就能大約推測(cè)出樣品中活菌數(shù)。

（4）培養(yǎng)分解尿素的細(xì)菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是_______________。

（5）實(shí)驗(yàn)中使用過(guò)的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)________處理后才能丟棄，以防止微生物的擴(kuò)散。

Answer 1

【答案】（1）不能 培養(yǎng)基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只以尿素為氮源的微生物（培養(yǎng)基含蛋白胨，蛋白胨中含有氮元素）

（2）高壓蒸汽滅菌 干熱滅菌 50 酒精燈火焰 培養(yǎng)皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基

（3）（稀釋）涂布平板 菌落數(shù)目

（4）將未接種的培養(yǎng)基在適宜溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生

（5）滅菌

【解析】（1）據(jù)表分析，表中的蛋白胨可以為微生物的生存提供氮源，尿素不是唯一氮源，所以不能選擇出只以尿素為氮源的微生物。

（2）培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌；培養(yǎng)皿耐高溫，可以采用干熱滅菌；培養(yǎng)基溫度過(guò)低會(huì)凝固，所以在50℃左右開始倒平板；倒平板時(shí)要無(wú)菌操作，一般在酒精燈火焰附近操作；培養(yǎng)基倒置能防止培養(yǎng)皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，以免造成污染。

（3）要統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中“活菌”數(shù)目，說(shuō)明應(yīng)采用稀釋涂布平板計(jì)數(shù)法；一般認(rèn)為每個(gè)細(xì)菌能增殖為一個(gè)菌落，根據(jù)菌落數(shù)目即可統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)目。

（4）檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染的方法一般是：將未接種的培養(yǎng)基在適宜溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。

（5）為防止微生物污染環(huán)境和操作者，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌后才能丟棄。