Question

【題目】真核生物基因中通常含有內(nèi)含子，而原核生物基因中沒(méi)有，原核生物沒(méi)有真核生物所具有的切除內(nèi)含子對(duì)應(yīng)的RNA序列的機(jī)制。下圖表示從基因文庫(kù)提取胰島素基因的過(guò)程，回答下列問(wèn)題：

（1）過(guò)程①用到的酶為_______________________，與基因組文庫(kù)中的基因相比，cDNA文庫(kù)中獲得的目的基因 _____________(填“不含有”或“含有”)啟動(dòng)子。

（2）過(guò)程②的目的是__________________。

（3）過(guò)程⑤需將纖維素膜上的細(xì)菌___________，釋放出DNA，再用32P標(biāo)記的__________作為探針進(jìn)行雜交。依據(jù)雜交結(jié)果，應(yīng)選取培養(yǎng)基上___________(填字母）菌落繼續(xù)培養(yǎng)，才能獲得含有膜島素基因的受體菌。

（4）與從基因組文庫(kù)獲取目的基因相比，圖示方法獲得的目的基因在受體菌中更容易表達(dá)，原因是______。

Answer 1

【答案】 逆轉(zhuǎn)錄酶 不含有 使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并遺傳給后代，同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)并發(fā)揮作用 裂解 目的基因（或胰島素基因） a cDNA中不含有內(nèi)含子，轉(zhuǎn)錄出的RNA不需要經(jīng)過(guò)加工，可直接作為合成蛋白質(zhì)的模板

【解析】試題分析：據(jù)圖分析，過(guò)程①表示逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程，需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化；過(guò)程②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建；過(guò)程③表示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞；過(guò)程④表示將細(xì)菌轉(zhuǎn)移到纖維素膜上；過(guò)程⑤表示目的基因的檢測(cè)。

（1）根據(jù)以上分析已知，過(guò)程①表示逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程，需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化；該過(guò)程獲得cDNA為部分基因文庫(kù)，由于其中目的基因是mRNA逆轉(zhuǎn)錄形成的，不含有啟動(dòng)子。

（2）過(guò)程②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并遺傳給后代，同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)并發(fā)揮作用。

（3）過(guò)程⑤需將纖維素膜上的細(xì)菌裂解，釋放出DNA，再用32P標(biāo)記的目的基因作為探針進(jìn)行雜交。依據(jù)雜交結(jié)果中雜交帶出現(xiàn)的位置可知，應(yīng)選取培養(yǎng)基上a菌落繼續(xù)培養(yǎng)，才能獲得含有膜島素基因的受體菌。

（4）圖示方法獲得的目的基因在受體菌中更容易表達(dá)，是因?yàn)閏DNA中不含有內(nèi)含子，轉(zhuǎn)錄出的RNA不需要經(jīng)過(guò)加工，可直接作為合成蛋白質(zhì)的模板。