Question

【題目】獼猴桃味道酸甜，維生素C含量豐富，以獼猴桃果實(shí)為原料，制成的果汁及經(jīng)發(fā)酵制成的果酒維生素C含量較高。請(qǐng)回答下列問題：

（1）制作果汁時(shí)常加入果膠酶，因?yàn)楣�膠酶可以通過分解果膠來提高果汁的____________。由于溶液中的酶很難回收，為了降低成本，使果膠酶能被再次利用，一般采用化學(xué)結(jié)合法或____________法將其固定。

（2）獼猴桃果酒制作時(shí)，發(fā)酵液未經(jīng)過嚴(yán)格的滅菌處理，雜菌卻不能正常生長(zhǎng)，這是因?yàn)?/span>____________________________________________。

（3）科研人員發(fā)現(xiàn)某種微生物中富含果膠酶，通過酶解法和吸水漲破法釋放出其中的果膠酶，分離該酶的方法有___________和電泳法，其中電泳法的原理是根據(jù)蛋白質(zhì)分子的___________、大小以及形態(tài)不同，在電場(chǎng)中的_______________________不同而實(shí)現(xiàn)分離。

（4）本實(shí)驗(yàn)中用SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳對(duì)所提取的酶進(jìn)行鑒定。根據(jù)如圖的電泳結(jié)果，某同學(xué)得出“所提取的酶具有兩條鏈”的結(jié)論，這種說法可靠嗎?理由是__________________________________。

Answer 1

【答案】出汁率和澄清度 物理吸附 果酒發(fā)酵的無氧、pH呈酸性條件和代謝產(chǎn)生的酒精抑制了雜菌的生長(zhǎng) 凝膠色譜法 帶電性質(zhì)差異（或帶電情況） 遷移速度 不可靠，只能得出提取的蛋白質(zhì)含有兩種大小不同的肽鏈，不一定是兩條

【解析】

1.果膠酶是分解果膠的一類酶的總稱，它包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶。產(chǎn)生果膠酶的生物有植物、霉菌、酵母菌和細(xì)菌等。果膠酶能夠分解果膠，瓦解植物的細(xì)胞壁及胞間層，使榨取果汁變得容易，也是果汁變得澄清。

2.凝膠色譜法：凝膠色譜法也稱做分配色譜法，是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法。所用的凝膠實(shí)際上是一-些微小的多孔球體，這些小球體大多數(shù)是由多糖類化合物構(gòu)成的，如葡聚糖或瓊脂糖。在小球體內(nèi)部有許多貫穿的通道，當(dāng)相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過凝膠時(shí)，相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)人凝膠內(nèi)部的通道，路程較長(zhǎng)，移動(dòng)速度較慢;而相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進(jìn)人凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動(dòng)，路程較短，移動(dòng)速度較快。相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子因此得以分離。

3.電泳是指帶電粒子在電場(chǎng)的作用下發(fā)生遷移的過程。許多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解離的基團(tuán)，在一定的pH下，這些基團(tuán)會(huì)帶上正電或負(fù)電。在電場(chǎng)的作用下，這些帶電分子會(huì)向著與其所帶電荷相反的電極移動(dòng)。電泳利用了待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、形狀的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離。

（1）由分析可知，果膠酶能催化分解果膠，從而提高果汁的出汁率和澄清度。為了使果膠酶能被再次利用，通常采用固定化酶技術(shù)來實(shí)現(xiàn)果膠酶的重復(fù)利用，由于酶分子量小，因此通常采用化學(xué)結(jié)合法或物理吸附法將其固定。

（2）酵母菌在無氧條件下進(jìn)行酒精發(fā)酵過程中產(chǎn)生的二氧化碳使得發(fā)酵液pH呈酸性，同時(shí)代謝產(chǎn)物酒精也能抑制雜菌，因此獼猴桃制成的發(fā)酵液在未經(jīng)嚴(yán)格的滅菌處理的條件下，雜菌也不能正常生長(zhǎng)。

（3）科研人員發(fā)現(xiàn)某種微生物中富含果膠酶，由于微生物具有細(xì)胞壁，需要通過酶解法去壁，然后通過吸水漲破法釋放出其中的果膠酶，再用凝膠色譜法和電泳法將果膠酶分離出來，其中電泳法的原理是根據(jù)蛋白質(zhì)分子的帶電性質(zhì)差異（或帶電情況）、大小以及形態(tài)不同，在電場(chǎng)中的遷移速度不同而實(shí)現(xiàn)分離。

（4）利用SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳獲得的分子的遷移速率完全取決于分子量的大小，因此，結(jié)合如圖電泳結(jié)果顯示的兩個(gè)聚集位點(diǎn)可知提取的蛋白質(zhì)中含有兩種大小不同的肽鏈，但不一定是兩條，因此該同學(xué)結(jié)論不可靠。