16．在胰島素的基因與質(zhì)粒形成重組DNA分子的過(guò)程中，下列哪組時(shí)所需要的（　�。�
A．用同一種限制酶切割兩者B．不需用同一種限制酶切割兩者
C．加入適量的DAN連接酶D．不需加DNA連接酶

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：在胰島素的基因與質(zhì)粒形成重組DNA分子的過(guò)程中，需先用同一種限制酶切割兩者，使其露出相同的黏性末端，然后加入適量的DAN連接酶，形成重組質(zhì)粒．
故選：AC．

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的概念、原理及操作步驟，掌握各步驟中的相關(guān)細(xì)節(jié)，了解基因工程技術(shù)在生產(chǎn)實(shí)踐中的相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．

練習(xí)冊(cè)系列答案
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（2009•重慶）下表有關(guān)基因表達(dá)的選項(xiàng)中，不可能的是（ ）

A．A B．B C．C D．D

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（2012•安徽）蛙的神經(jīng)元內(nèi)、外Na+濃度分別是15mmol/L和120mmol/L，在膜電位由內(nèi)負(fù)外正轉(zhuǎn)變?yōu)閮?nèi)正外負(fù)過(guò)程中有Na+流入細(xì)胞，膜電位恢復(fù)過(guò)程中有Na+排出細(xì)胞．下列判斷正確的是（ ）

A．Na+流入是被動(dòng)運(yùn)輸、排出是主動(dòng)運(yùn)輸

B．Na+流入是主動(dòng)運(yùn)輸、排出是被動(dòng)運(yùn)輸

C．Na+流入和排出都是被動(dòng)運(yùn)輸

D．Na+流入和排出都是主動(dòng)運(yùn)輸

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：解答題

4．科學(xué)家將魚(yú)抗凍蛋白基因轉(zhuǎn)入番茄，番茄耐寒能力大大提高，可以在相對(duì)寒冷的環(huán)境中生長(zhǎng)．質(zhì)粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四種限制酶切割位點(diǎn)．下圖是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過(guò)程的示意圖（ampr為抗氨芐青霉素基因），其中①～④是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過(guò)程中的相關(guān)步驟，Ⅰ、Ⅱ表示相關(guān)結(jié)構(gòu)或細(xì)胞，請(qǐng)據(jù)圖作答．

（1）圖中涉及的技術(shù)有：DNA重組技術(shù)、植物組織培養(yǎng)技術(shù)（答出兩點(diǎn)）．
（2）在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，可用一種或多種限制酶進(jìn)行切割．為了避免目的基因和載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，在此實(shí)例中，應(yīng)該選用Pst I、Sam I，分別對(duì)目的基因和質(zhì)粒進(jìn)行切割，切割后產(chǎn)生的DNA片段分別為4、2種．
（3）圖中I ampr基因的目的是重組質(zhì)粒的鑒定和篩選，除了ampr、魚(yú)的抗凍蛋白基因以外，還應(yīng)具有的結(jié)構(gòu)是啟動(dòng)子、終止子．
（4）研究人員通常采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化（或基因槍法等）法將魚(yú)抗凍蛋白基因?qū)敕鸭?xì)胞內(nèi)．通常采用抗原-抗體雜交技術(shù)，在分子水平檢測(cè)目的基因是否翻譯形成了相應(yīng)的蛋白質(zhì)．

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：選擇題

11．抗蟲(chóng)棉的產(chǎn)生具有重大的意義，在抗蟲(chóng)棉產(chǎn)生過(guò)程中，毒蛋白基因的受體細(xì)胞是（　　）
A．棉花受精卵細(xì)胞B．棉花分裂旺盛的體細(xì)胞
C．棉花的花粉粒D．棉花任何細(xì)胞

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：解答題

1．現(xiàn)代生物技術(shù)制備H7N9病毒單克隆抗體的流程，請(qǐng)回答問(wèn)題．

（1）①過(guò)程表示逆轉(zhuǎn)錄，②過(guò)程用到的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）．
（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，目的基因的首端必須含有啟動(dòng)子，它的作用是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需要的蛋白質(zhì)，尾端必須有終止子，標(biāo)記基因的作用為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)，③過(guò)程常用的方法是顯微注射法，目的基因能否在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA上是否插入了目的基因．
（3）從分子水平上鑒定目的基因是否轉(zhuǎn)錄可采用分子雜交技術(shù)，檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)采用的方法抗原-抗體雜交
（4）若要預(yù)防H7N9禽流感，可用圖中的抗原蛋白作為疫苗．

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：解答題

8．如圖所示為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過(guò)程示意圖．

請(qǐng)回答：
（1）容器A 中放里的一般是幼齡動(dòng)物的器官或組織，原因是其細(xì)胞分裂能力強(qiáng)，易于培養(yǎng)．培養(yǎng)時(shí)先要剪碎，然后用胰蛋白酶分散細(xì)胞，制成B 瓶中的細(xì)胞懸液．將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)入C 瓶中進(jìn)行的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)．
（2）細(xì)胞正常培養(yǎng)了一段時(shí)間后，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞絕大部分死亡，只有極少數(shù)細(xì)胞存活，這是因?yàn)榇婊畹募?xì)胞發(fā)生了突變，可無(wú)限增殖．目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常為10代以內(nèi)，以保持細(xì)胞正常的二倍體核型．
（3）C、D 瓶中的培養(yǎng)液為保證無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境，需要添加一定量的抗生素．培養(yǎng)過(guò)程中還需要提供O2和CO2 等氣體環(huán)境，CO2的作用主要是維持培養(yǎng)液的PH值．
（4）動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)，通常要在培養(yǎng)基中補(bǔ)充一定濃度的某些物質(zhì)．下圖是血清對(duì)正常細(xì)胞和癌細(xì)胞培養(yǎng)影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果．據(jù)圖可知，培養(yǎng)培養(yǎng)正常細(xì)胞一定需要添加血清．

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：選擇題

5．如圖為某種真菌細(xì)胞線粒體中蛋白質(zhì)的生物合成局部示意圖．下列相關(guān)敘述正確的是（　�。�
A．①③過(guò)程既可在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)又可在線粒體中進(jìn)行
B．②④過(guò)程均在核糖體中進(jìn)行
C．線粒體的功能不受細(xì)胞核基因的控制
D．遺傳信息能從核DNA傳遞給線粒體DNA

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：選擇題

5．紅樹(shù)木是熱帶亞熱帶海岸帶海陸交錯(cuò)區(qū)重要的生態(tài)系統(tǒng)，在防風(fēng)固浪、全球碳循環(huán)及涵洋物多樣性等生態(tài)系統(tǒng)服務(wù)功能方面扮演著重要角色．下列說(shuō)法正確的是（　　）
A．太陽(yáng)能屬于紅樹(shù)木生態(tài)系統(tǒng)的成分
B．碳元素從紅樹(shù)木中的輸出只能依靠分解者的分解作用
C．紅森林大量死亡則紅森林生態(tài)系統(tǒng)抵抗力穩(wěn)定性下降，恢復(fù)力穩(wěn)定性上升
D．紅森林生態(tài)系統(tǒng)由于物種單一易受到病蟲(chóng)害影響而導(dǎo)致生態(tài)失衡

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