Question

12．白血病是由于造血干細(xì)胞增殖分化異常而引起的惡性增殖性疾�。�目前治療白血病的主要方法是骨髓移植，但骨髓配型的成功率較低，大大限制了白血病的治療．隨著基因工程的日漸興起，迎來(lái)了基因治療白血病的曙光．請(qǐng)回答下列相關(guān)問(wèn)題：
（1）骨髓移植必須進(jìn)行骨髓配型實(shí)驗(yàn)，原因是防止發(fā)生過(guò)強(qiáng)的免疫排斥反應(yīng)．目前，臨床上通常通過(guò)使用免疫抑制劑來(lái)提高造血干細(xì)胞移植的成活率．
（2）造血干細(xì)胞移植之前先要進(jìn)行培養(yǎng)．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一般分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩個(gè)階段．對(duì)于培養(yǎng)的環(huán)境條件，除需要適宜的溫度、無(wú)菌無(wú)毒等以外，還要向培養(yǎng)液中通人氧氣和二氧化碳，通人氧氣的目的是保證細(xì)胞能夠進(jìn)行有氧呼吸，通人二氧化碳的目的是維持培養(yǎng)液的pH；對(duì)子所用的培養(yǎng)液，應(yīng)定期更換，其目的是清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害．
（3）在進(jìn)行細(xì)胞移植前，有時(shí)需對(duì)移植的細(xì)胞進(jìn)行基因改造．要了解基因改造是否成功，可在分子水平上檢測(cè)是否翻譯成了相應(yīng)的蛋白質(zhì)，常用的方法是抗原一抗體雜交法．
（4）上述使用的正常細(xì)胞，通常為10代以?xún)?nèi)，以保持細(xì)胞正常的二倍體核型．
（5）哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞是從早期胚胎或原始性腺中分離出來(lái)的一類(lèi)細(xì)胞，可以在體外被誘導(dǎo)分化形成新的組織細(xì)胞，這使科學(xué)家進(jìn)一步培育人造骨髓成為可能．

Answer 1

分析 1、原代培養(yǎng)：從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞為原代細(xì)胞．初次培養(yǎng)稱(chēng)為原代細(xì)胞培養(yǎng)．
2、傳代培養(yǎng)：將原代細(xì)胞從培養(yǎng)瓶中取出，配制成細(xì)胞懸浮液，分裝到兩個(gè)或兩個(gè)以上的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，稱(chēng)為傳代培養(yǎng)．
3、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件：
（1）無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物．
（2）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)．
（3）溫度和PH：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4．
（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO₂（維持培養(yǎng)液的PH）．
4、胚胎干細(xì)胞
（1）哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱(chēng)ES或EK細(xì)胞，來(lái)源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來(lái)．
（2）具有胚胎細(xì)胞的特性，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞．另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可進(jìn)行遺傳改造．
（3）胚胎干細(xì)胞的主要用途是：
①可用于研究哺乳動(dòng)物個(gè)體發(fā)生和發(fā)育規(guī)律；
②是在體外條件下研究細(xì)胞分化的理想材料，在培養(yǎng)液中加入分化誘導(dǎo)因子，如牛黃酸等化學(xué)物質(zhì)時(shí)，就可以誘導(dǎo)ES細(xì)胞向不同類(lèi)型的組織細(xì)胞分化，這為揭示細(xì)胞分化和細(xì)胞凋亡的機(jī)理提供了有效的手段；
③可以用于治療人類(lèi)的某些頑疾，如帕金森綜合癥、少年糖尿病等；
④利用可以被誘導(dǎo)分化形成新的組織細(xì)胞的特性，移植ES細(xì)胞可使壞死或退化的部位得以修復(fù)并恢復(fù)正常功能；
⑤隨著組織工程技術(shù)的發(fā)展，通過(guò)ES細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化，定向培育出人造組織器官，用于器官移植，解決供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問(wèn)題．

解答 解：（1）骨髓移植必須進(jìn)行骨髓配型實(shí)驗(yàn)，原因是防止發(fā)生過(guò)強(qiáng)的免疫排斥反應(yīng)．目前，臨床上通常通過(guò)使用免疫抑制劑來(lái)提高造血干細(xì)胞移植的成活率．
（2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一般分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩個(gè)階段．對(duì)于培養(yǎng)的環(huán)境條件，除需要適宜的溫度、無(wú)菌無(wú)毒等以外，還要向培養(yǎng)液中通人氧氣和二氧化碳，通人氧氣的目的是保證細(xì)胞能夠進(jìn)行有氧呼吸，通人二氧化碳的目的是維持培養(yǎng)液的pH；對(duì)子所用的培養(yǎng)液，應(yīng)定期更換，其目的是清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害．
（3）在分子水平上檢測(cè)是否翻譯成了相應(yīng)的蛋白質(zhì)，常用抗原一抗體雜交法．
（4）上述使用的正常細(xì)胞，通常為10代以?xún)?nèi)，以保持細(xì)胞正常的二倍體核型．
（5）哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞是從早期胚胎或原始性腺中分離出來(lái)的一類(lèi)細(xì)胞，具有發(fā)育的全能性，可以在體外被誘導(dǎo)分化形成新的組織細(xì)胞，這使科學(xué)家進(jìn)一步培育人造骨髓成為可能．
故答案為：
（1）防止發(fā)生過(guò)強(qiáng)的免疫排斥反應(yīng)   免疫抑制劑
（2）原代培養(yǎng)  傳代培養(yǎng)   保證細(xì)胞能夠進(jìn)行有氧呼吸    維持培養(yǎng)液的pH    清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害
（3）抗原一抗體雜交法
（4）10
（5）早期胚胎或原始性腺    分化

點(diǎn)評(píng) 本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎干細(xì)胞等知識(shí)，要求考生識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的類(lèi)型、條件等基礎(chǔ)知識(shí)；識(shí)記胚胎干細(xì)胞的來(lái)源、特點(diǎn)及相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．