Question

13．通過基因工程研制的某新型基因治療藥物，其本質是利用腺病毒和人P53基因（抑癌基因）拼裝得到的重組病毒．人的P53蛋白可對癌變前的DNA損傷進行修復，使其恢復正常，或誘導其進入休眠狀態(tài)或細胞凋亡，阻止細胞癌變．該藥物的載體采用第一代人5型腺病毒，其致病力很弱，其基因不整合到宿主細胞的基因組中，無遺傳毒性；載體經(jīng)基因工程改造后，只對細胞實施一次感染，不能復制，不會污染．請回答下列問題：
（1）在該藥物的生產(chǎn)中，為了獲得更高的安全性能，在載體一般應具備的條件中，科學家選擇性地放棄了一般載體都應該具有的自我復制（復制原點）（在“能自我復制”“有多個限制性酶切位點”“在宿主細胞中能穩(wěn)定保存”中選答）．檢測P53基因基因是否插入到染色體上，可從分子水平上檢測，方法是DNA分子雜交．
（2）如果要獲取人類基因組中抑癌基因P53，可以采取的方法通常包括從細胞中分離和人工方法合成．目的基因的大量擴增則可以采用PCR技術技術，該技術中需使用一種特殊的酶是熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）．
（3）如果要獲得胚胎干細胞進行研究，則胚胎干細胞可來源于囊胚的內細胞團，或胎兒的原始性腺，也可以通過核移植技術得到重組細胞后在進行相應處理獲得．在培養(yǎng)液中加入分化誘導因子，如牛黃酸等化學物質時就可以誘導胚胎干細胞向不同類型的組織細胞分化，這為揭示細胞分化和細胞凋亡的機理提供了有效的手段．

Answer 1

分析 1、基因工程中獲得目的基因的方法有三種：①從基因文庫中獲取；②利用PCR技術擴增；③人工合成．
2、目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
3、PCR的條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）．
3、胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞，來源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內細胞團）．胚胎干細胞是在體外條件下研究細胞分化的理想材料．ES細胞在飼養(yǎng)層細胞上或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中，能夠維持不分化的狀態(tài)．在培養(yǎng)液中加入分化誘導因子，如牛黃酸、丁酰環(huán)腺苷酸等化學物質時，就可以誘導ES細胞向分化，這為揭示細胞分化和細胞凋亡機理提供了有效的手段；

解答 解：（1）據(jù)題意可知，載體經(jīng)基因工程改造后，只對細胞實施一次感染，不能復制，不能污染．故在載體一般應具備的條件中，科學家選擇性地放棄了一般載體都應該具有的自我復制功能．檢測目的基因是否導入受體細胞，可采用DNA分子雜交技術．
（2）如果要獲取人類基因組中抑癌基因P53，可以采取的方法通常包括從細胞中分離和通過化學方法人工合成．目的基因的大量擴增則可以采用PCR技術，該技術需要高溫處理，因此需使用的一種特殊的酶是熱穩(wěn)定DNA聚合酶．
（3）胚胎干細胞可來源于早期胚胎（囊胚期的內細胞團）或原始性腺，也可以通過核移植技術得到重組細胞后再進行相應處理獲得．在培養(yǎng)液中加入分化誘導因子，如牛黃酸等化學物質時就可以誘導胚胎干細胞向不同類型的組織細胞分化，這為揭示細胞分化和細胞凋亡的機理提供了有效的手段． 
故答案為：
（1）自我復制（復制原點）  DNA分子雜交
（2）從細胞中分離    PCR技術         熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）   
（3）囊胚        核移植          分化誘導因子

點評 本題考查基因工程和胚胎工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)；識記胚胎干細胞的來源、特點及相關應用，能結合所學的知識準確答題．