Question

【題目】【生物——選修1：生物技術實踐專題】蛋白酶在生物醫(yī)藥和日用化工等生產領域具有重要的經濟價值。某同學為篩選產蛋白酶的高產菌株，做了如下實驗步驟（配置了下列培養(yǎng)基，在適宜條件下培養(yǎng)）：

步驟	取樣	培養(yǎng)基	培養(yǎng)結果
I	土壤樣品	葡萄糖，（NH4）2SO4，K2HPO4·3H2O，KH2PO4,NaCl，CaCl2, MgSO4·7H2O，加水定容	培養(yǎng)液a
II	1mL培養(yǎng)液a	同上	菌落
III	挑取單菌落	細菌培養(yǎng)基	培養(yǎng)液b

（1）為實現篩選目的，步驟I所使用的培養(yǎng)基配方中，應去除_____________并加入高濃度的_____________。

（2）為實現目的菌的分離和計數，步驟II所使用的培養(yǎng)基中還應加入_____________制成平板，采用的接種方法是_____________，實驗結果如圖A。

（3）步驟III應挑取圖A中_____________處的菌落，本步驟的目的是____________________。

（4）圖B是該蛋白酶和其它酶的熱穩(wěn)定性數據，即酶在不同溫度下保溫足夠長的時間，再在酶活性最高的溫度下測其酶活性。在該蛋白酶的工業(yè)化生產過程中，通常需對發(fā)酵液在60—70℃保溫一定時間的，其作用是_________________。

Answer 1

【答案】葡萄糖蛋白質瓊脂稀釋涂布平板法a快速增加目的菌的種群數量（擴大培養(yǎng)）大幅度降低發(fā)酵液中其他酶的活性

【解析】本題考查微生物的選擇培養(yǎng)及酶活性的檢測，意在考查考生理解相關知識的要點，把握知識間的聯系，形成知識網絡結構的能力；具備探究簡單生物學問題的能力，并能對實驗現象和結果進行解釋、分析和處理的能力。

（1）培養(yǎng)基中添加特定的成分以促進需要的微生物生長而抑制其它微生物生長，用于進行微生物篩選；根據題意，為篩選產蛋白酶的高產菌株，步驟I所使用的培養(yǎng)基配方中，應去除葡萄糖并加入高濃度的蛋白質。

（2）為實現目的菌的分離和計數，步驟II所使用的培養(yǎng)基中還應加入瓊脂（凝固劑）制成平板，采用的接種方法是稀釋涂布平板法。

（3）圖A中a處的菌落透明圈最大，故其菌種分解蛋白質的能力最強，所以步驟III應挑取圖A中a處的菌落，本步驟的目的是快速增加目的菌的種群數量（即擴大培養(yǎng)）。

（4）圖B曲線表明，60—70℃條件下，蛋白酶的活性很高而此時其它酶的活性很低，因此在該蛋白酶的工業(yè)化生產過程中，通常需對發(fā)酵液在60—70℃保溫一定時間的，可大幅度降低發(fā)酵液中其他酶的活性。