Question

15．如圖表示利用羊生產(chǎn)抗凝血酶的過程，圖中amp^R表示氨芐青霉素抗性基因，tet^R表示四環(huán)素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ為三種限制酶及酶切位點，據(jù)圖回答問題：

（1）通常采用PCR技術來擴增獲得抗凝血酶基因，其原理是DNA雙鏈復制，需要熱穩(wěn)定DNA聚合（Taq）酶．據(jù)圖分析，可將目的基因插入四環(huán)素（tet^R）抗性基因中．
（2）質粒的化學本質是DNA（小型環(huán)狀DNA），基因工程常用的運載體還有λ噬菌體的衍生物、動物或植物病毒．
（3）過程①可采用顯微注射的方法將重組質粒導入羊受精卵中，可采用分子雜交技術來檢測抗凝血酶基因是否轉錄成功．

Answer 1

分析 1、基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
2、分析題圖：圖中①表示將目的基因導入受體細胞；②表示胚胎移植技術．

解答 解：（1）PCR技術可在體外大量擴增目的基因，其原理是DNA雙鏈復制；PCR操作過程在較高溫度下進行，因此需要熱穩(wěn)定DNA聚合（Taq） 酶．由圖可知，目的基因插入四環(huán)素（tet^R）抗性基因中．
（2）質粒是小型環(huán)狀DNA分子；基因工程常用的運載體還有λ噬菌體的衍生物、動物或植物病毒．
（3）將目的基因導入動物細胞常用顯微注射法；檢測目的基因是否轉錄可采用分子雜交技術．
故答案為：
（1）PCR    DNA雙鏈復制   熱穩(wěn)定DNA聚合（Taq）      四環(huán)素（tet^R）
（2）DNA（小型環(huán)狀DNA）   λ噬菌體的衍生物、動物或植物病毒
（3）顯微注射    分子雜交

點評 本題難度適中，屬于考綱中識記、理解層次的要求，著重考查了基因工程的步驟、目的基因導入動物細胞的方法等相關知識，要求考生具有一定的識圖能力，并能識記相關基礎知識．