Question

【題目】某同學(xué)用新鮮的泡菜濾液為實(shí)驗(yàn)材料純化乳酸菌。分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣。回答下列問(wèn)題：

（1）分離純化乳酸菌時(shí)，首先需要用__________________對(duì)泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋，進(jìn)行梯度稀釋的理由是_____________________________，這種純化方法稱為_____________________法。

（2）推測(cè)在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有__________________________和________________________。分離純化時(shí)應(yīng)挑選出________________的菌落作為候選菌。

（3）從用途上看，這種培養(yǎng)基屬于_________________培養(yǎng)基。

（4）乳酸菌在-20℃長(zhǎng)期保存時(shí)，菌液中常需要加入一定量的________________（填“蒸餾水”、“甘油”或“碳酸鈣”）。

Answer 1

【答案】 無(wú)菌水 泡菜濾液中菌的濃度高，直接培養(yǎng)很難得到單菌落 稀釋涂布平板法 鑒別乳酸菌 中和產(chǎn)生的乳酸 具有透明圈 選擇 甘油

【解析】試題分析：結(jié)合題干信息，為了分離純化乳酸菌，得到單菌落，防止雜菌感染，應(yīng)用無(wú)菌水稀釋，通過(guò)涂布平板法達(dá)到目的。其中觀察篩選依據(jù)是能產(chǎn)生乳酸的乳酸菌菌落周?chē)鷷?huì)出現(xiàn)透明圈，因?yàn)槿樗釙?huì)溶解選擇培養(yǎng)基中碳酸鈣而出現(xiàn)透明圈。

（1）由于泡菜濾液中，乳酸菌的濃度過(guò)高，因此若直接培養(yǎng)難以得到單一菌落，進(jìn)而影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)效果。為了避免其他菌類影響實(shí)驗(yàn)效果，因此在進(jìn)行泡菜濾液梯度稀釋時(shí)應(yīng)使用無(wú)菌水。這種純化方法稱為稀釋涂布平板法。

（2）由于乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能夠溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣，因此碳酸鈣的第一個(gè)作用為鑒別乳酸菌。而過(guò)酸的環(huán)境可能會(huì)影響乳酸菌的生長(zhǎng)，進(jìn)而影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)效果，因此碳酸鈣的第二個(gè)作用為中和產(chǎn)生的乳酸。乳酸能夠溶解碳酸鈣，產(chǎn)生無(wú)色物質(zhì)，因此具有透明圈的菌落為產(chǎn)生乳酸的乳酸菌菌落。

（3）從用途上看，這種培養(yǎng)基是為了讓所需菌種生存繁殖，而盡可能讓其他微生物淘汰，所以屬于選擇培養(yǎng)基。

（4）由于乳酸菌是厭氧細(xì)菌，因此在長(zhǎng)期保存乳酸菌時(shí)，應(yīng)該菌液中加入一定量的甘油，其目的是隔絕氧氣。