Question

回答下列有關生物工程的問題．圖為轉基因抗病香蕉的培育過程流程圖，其中質粒上的PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四種限制酶的識別序列及切割位點見表．
 

限制酶	ApaⅠ	EcoRⅠ	PstⅠ	SmaⅠ
識別序列和切割位點

（1）圖中①②分別表示組織培養(yǎng)過程中香蕉組織細胞的

 

和

 

．利用組織培養(yǎng)技術將導入抗病基因的香蕉組織細胞培育成植株，證明了香蕉組織細胞具有

 

．
（2）形成重組質粒A時，應選用限制酶

 

，對

 

進行切割．
（3）一個質粒被限制酶EcoR I、PstⅠ、SmaⅠ同時切割后可得到

 

個DNA片段．如果質粒還可以被限制酶X切割，形成的黏性末端為，則限制酶X的識別序列為

 

（標明切割位點）．
（4）培養(yǎng)基中的氨芐青霉素會抑制香蕉愈傷組織細胞的生長，欲利用該培養(yǎng)基篩選已導入抗病基因的香蕉細胞，應使重組質粒A中含有

 

基因．

Answer 1

考點：基因工程的應用,植物培養(yǎng)的條件及過程

專題：

分析：分析題圖：含有目的基因的外源DNA分子含有限制酶Sma I、Pst I和EcoRI的切割位點，但限制酶Sma I的切割位點位于目的基因上，所以應選限制酶Pst I和EcoRI對目的基因進行切割．質粒會被限制酶EcoR I、Pst l、Sma I同時切割成三段．圖中①②表示植物組織培養(yǎng)過程，其中①表示脫分化、②表示再分化過程．

解答： 解：（1）由以上分析可知：①②表示植物組織培養(yǎng)過程，其中①表示脫分化、②表示再分化，植物組織培養(yǎng)的原理是植物細胞具有全能性．
（2）限制酶Sma I的切割位點位于目的基因上，用該酶切割含有目的基因的外源DNA分子時會破壞目的基因，所以選限制酶Pst I和EcoRI對目的基因進行切割，這樣不會對目的基因造成破壞．故使用這兩種限制酶切割目的基因和質粒．
（3）質粒會被限制酶EcoR I、Pst l、Sma I同時切割成三段．如果質粒還可以被限制酶X切割，形成的黏性末端為，則限制酶X的識別序列為

GGTACC  .

CCATGG

，切割位點位于C和C之間．

（4）培養(yǎng)基中的氨芐青霉素會抑制香蕉愈傷組織細胞的生長，所以導入的重組質粒中要含氨芐青霉素抗性基因，才能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基是生長．
故答案：
（1）脫分化  再分化  全能性
（2）PstⅠ和EcoRⅠ含抗病基因的DNA和質粒
（3）3    

GGTACC  .

CCATGG

，切割位點位于C和C之間 
（4）抗氨芐青霉素（或氨芐青霉素抗性）

點評：本題結合轉基因香蕉形成的流程圖，考查基因工程的應用的知識，意在考查學生的識圖能力和對基因工程的相應知識的理解能力；能在較復雜情景中綜合運用相應知識進行分析、判斷、推理和評價的能力．