Question

【題目】請分析下面一項專利：

(1)此基因工程中，所用的目的基因是___________。將人工合成的DNA片段拼接在一起，所必需的工具酶是_________________。

(2)在C端加上KDEL的內質網(wǎng)滯留序列目的是使___________，以免在細胞內被降解。啟動子是_________識別和結合的部位，有了它才能驅動基因的轉錄。

(3)農桿菌介導的方法是將目的基因插入農桿菌Ti質粒的____________上以構建__________。檢測受體細胞中是否存在人胰島素可用___________技術，若有_______出現(xiàn)，表明目的基因已形成相應的蛋白質產品。

Answer 1

【答案】 人胰島素基因 DNA連接酶 胰島素合成后在內質網(wǎng)中保存 RNA聚合酶 T-DNA 基因表達載體 抗原-抗體雜交 雜交帶

【解析】試題分析：基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取 ②基因表達載體的構建③將目的基因導入受體細胞④目的基因的檢測與鑒定。獲得目的基因的方法：①從基因文庫中獲��；②利用PCR技術擴增；③人工合成（反轉錄法和化學合成）。

（1）根據(jù)表格分析可知，此基因工程中的目的基因是人胰島素基因。基因工程中，將目的基因與運載體連接的酶是DNA連接酶。

（2）重組時，在C端加上KDEL的內質網(wǎng)滯留序列的目的是使合成的胰島素在內質網(wǎng)中保存，以免被降解。啟動子具有RNA聚合酶識別和結合的部位，能驅動基因的轉錄過程。

（3）農桿菌介導的方法是將目的基因插入農桿菌Ti質粒的T-DNA上以構建基因表達載體。胰島素的本質是蛋白質，所以檢測受體細胞中是否存在人胰島素，可以采用抗原-抗體雜交技術，若有雜交帶出現(xiàn)，表明目的基因已形成相應的蛋白質產品。