Question

目前，精子載體法逐漸成為最具誘惑力的制備轉(zhuǎn)基因動(dòng)物方法之一，該方法以精子作為外源基因的載體，使精子攜帶外源基因進(jìn)入卵細(xì)胞受精．如圖表示利用該方法制備轉(zhuǎn)基因鼠的基本流程．請(qǐng)據(jù)圖回答：
（1）獲取外源基因用到的工具酶是

 

，為了提高實(shí)驗(yàn)成功率，通常利用

 

技術(shù)獲得大量標(biāo)記的外源基因．
（2）外源基因能夠整合到精子的

 

上是提高轉(zhuǎn)化率的關(guān)鍵，因?yàn)槭芫珪r(shí)只有精子的

 

才能進(jìn)入卵細(xì)胞中．
（3）過程②采用的是

 

技術(shù)，該過程中應(yīng)對(duì)已經(jīng)導(dǎo)入外源基因的精子進(jìn)行

 

處理．
（4）過程③需要在

 

（至少寫出兩點(diǎn)）等條件下進(jìn)行．由于人們對(duì)動(dòng)物細(xì)胞所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)還沒有完全搞清楚，因此在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)需在培養(yǎng)基中加入一定量的

 

．
（5）為了獲得更多的早期胚胎，常用

 

激素對(duì)供體進(jìn)行處理，使其

 

，從而獲得更多的卵母細(xì)胞．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù),動(dòng)物細(xì)胞與組織培養(yǎng)過程

專題：

分析：1、分析圖可知，通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)將目的基因?qū)�入到成熟精子的染色體中，再通過體外受精作用將目的基因移入到受精卵中，再通過早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植，最終獲得轉(zhuǎn)基因鼠．①過程是轉(zhuǎn)化目的基因進(jìn)入精子的染色體上，②過程是體外受精，③過程是早期胚胎培養(yǎng)，④過程是胚胎移植．
2、PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因（適用于目的基因的核苷酸序列已知的情況）．PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)，其原理是DNA復(fù)制，需要模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶），以指數(shù)的方式擴(kuò)增，即約2n．可以在短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因．

解答： 解：（1）獲取目的基因時(shí)，需要限制酶切割．為了提高實(shí)驗(yàn)成功率，可以通過PCR擴(kuò)增技術(shù)，可以在短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因．
（2）精子與卵細(xì)胞受精時(shí)，將精子的頭部進(jìn)入卵細(xì)胞中，并釋放其細(xì)胞核進(jìn)入卵細(xì)胞，但細(xì)胞質(zhì)為進(jìn)入．為了提高轉(zhuǎn)化率，必須將外源基因整合到精子的染色體中，才可以使外源基因進(jìn)入受精卵中．
（3）②過程是攜帶外源基因的精子與卵細(xì)胞發(fā)生體外受精，形成受精卵．精子必須獲能才可以與卵細(xì)胞發(fā)生受精作用．
（4）受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)，培養(yǎng)液成分一般都比較復(fù)雜，除了含有各種無機(jī)鹽、有機(jī)鹽類、維生素、氨基酸、核苷酸、激素等外，還要添加血清等物質(zhì)．
（5）卵母細(xì)胞的采集可以用促性腺激素作用與雌性動(dòng)物，使其超數(shù)排卵，以此獲取較多的卵母細(xì)胞．
故答案為：
（1）限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）   PCR
（2）染色體   頭部（細(xì)胞核）
（3）體外受精   獲能
（4）無菌無毒、適宜的溫度和PH、營(yíng)養(yǎng)充足、氣體環(huán)境     動(dòng)物血清（或血漿）
（5）促性腺   超數(shù)排卵

點(diǎn)評(píng)：本題考查基因工程和胚胎工程的相關(guān)內(nèi)容，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系；理論聯(lián)系實(shí)際，綜合運(yùn)用所學(xué)知識(shí)解決自然界和社會(huì)生活中的一些生物學(xué)問題的能力．