Question

為了解基因結(jié)構(gòu)，通常選取一特定長度的線性DNA分子，先用一種限制酶切割，通過電泳技術(shù)將單酶水解片段分離，計算相對大小；然后再用另一種酶對單酶水解片段進行降解，分析片斷大�。�下表是某小組進行的相關(guān)實驗．

已知一線性DNA序列共有5000bp（bp為堿基對）	第一步水解	產(chǎn)物 （單位bp）	第二步水解	產(chǎn)物 （單位bp）
	A酶切割	2100	將第一步水解產(chǎn)物分離后，分別用B酶切割	1900   200
		1400		800    600
		1000		1000
		500		500
	B酶切割	2500	將第一步水解產(chǎn)物分離后，分別用A酶切割	1900   600
		1300		800    500
		1200		1000   200
	經(jīng)A酶和B酶同時切割	19001000    800    600    500    200

（1）該實驗設計主要體現(xiàn)了

 

原則．
（2）由實驗可知，在這段已知序列上，A酶與B酶的識別序列分別為

 

個和

 

個．
（3）根據(jù)表中數(shù)據(jù)，請在圖1中標出相應限制性酶的酶切位點并注明相關(guān)片斷的大�。�
（4）已知BamHⅠ與BglⅡ的識別序列及切割位點如圖2所示，用這兩種酶和DNA連接酶對一段含有數(shù)個BamHⅠ和BglⅡ識別序列的DNA分子進行反復的切割、連接操作，若干循環(huán)后“AGATCC∥TCTAGG”和

 

序列明顯增多，該過程中DNA連接酶催化

 

鍵的形成．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：分析表格：已知一線性DNA序列共有5000bp，線性DNA經(jīng)A酶切割后形成2100bp、1400bp、1000bp、500bp共4個片段，說明酶A有3個切割位點；再經(jīng)B酶切割后，2100bp被切割成了1900bp和200bp，1400bp被切割成了800bp和600bp，1000bp和500bp沒有被切割，說明酶B有2個切割位點．

解答： 解：（1）該實驗設計主要體現(xiàn)了對照（單一變量）原則．
（2）單獨用A酶切割后形成4個片段，說明有3個A酶識別位點；單獨用B酶切割后形成3個片段，說明有2個B酶切割位點．
（3）由表中酶切割后片段長度可知，1900+600=2500，800+500=1300，1000+200=1200，所以連接如圖所示．

（4）巳知BamHI與BglII的識別序列及切割位點如圖2所示．用這兩種酶和DNA連接酶對一段含有數(shù)個BamHⅠ和BglⅡ識別序列的DNA分子進行反復的切割、連接操作，若干循環(huán)后和序列明顯增多．DNA連接酶催化形成的是磷酸二酯鍵．
故答案為：
（1）對照（單一變量）
（2）3           2
（3）
（4）   磷酸二酯鍵

點評：本題結(jié)合圖表，考查基因工程的原理及技術(shù)，要求考生識記基因工程的原理、工具及操作步驟，重點考查要求理解和掌握限制酶和DNA連接酶的作用部位和作用對象，能結(jié)合表中信息準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．