Question

內(nèi)蒙古白絨山羊的血管內(nèi)皮生長因子基因（VEGF164），若在皮膚毛囊細胞中特異性表達，可促進毛囊 發(fā)育和毛發(fā)生長，顯著提高羊毛產(chǎn)量。科學(xué)家將該基因?qū)�入羊胎兒的成纖維細胞核，成功培育出轉(zhuǎn)基因克隆山羊。技術(shù)流程如下圖，其中EcoRⅠ、SalⅠ、SphⅠ為限制酶。

請據(jù)圖回答。

⑴在構(gòu)建基因表達載體的過程中，應(yīng)采用______（填限制酶名稱）對質(zhì)粒和含綠色熒光基因的DNA片段進行酶切，再經(jīng)相應(yīng)處理形成重組質(zhì)粒。其中綠色熒光基因的作用是______。

⑵要使VEGF164在皮膚毛囊中表達，須將它與羊絨蛋白基因的______等調(diào)控組件重組起來，構(gòu)建基因表達載體。

⑶圖中①將基因表達載體導(dǎo)入胎兒成纖維細胞核的方法是______。將導(dǎo)入成功的細胞核注入到去核的卵母細胞構(gòu)成重組細胞，培養(yǎng)成早期胚胎，經(jīng)圖中②______技術(shù)可培育成轉(zhuǎn)基因克隆山羊。

 

Answer 1

【答案】

⑴SalⅠ、SphⅠ   作為標記基因，檢測目的基因是否導(dǎo)入成纖維細胞（作為標記基因）

⑵啟動子、終止子（啟動子）

⑶顯微注射法      胚胎移植

【解析】

 試題分析：（1）構(gòu)建基因表過載體時，應(yīng)保證有標記基因、目的基因，因此在選擇限制酶時，保證目的基因和標記基因不被破壞，同時應(yīng)有相同黏性末端，本題中綠色熒光基因作為標記基因用于檢測目的基因是否導(dǎo)和受體細胞，在選擇限制酶時不能用EcoRⅠ，而選擇SalⅠ、SphⅠ。（2）基因表達載體的構(gòu)成還需要啟動子和終止子。才能正確表達。(3)動物基因工程中將目的基因?qū)�入受體細胞常用顯微注射法，動物胚胎工程得到的早期胚胎通過胚胎移植技術(shù)可培育成轉(zhuǎn)基因克隆山羊。

考點：本題考查了基因工程、細胞工程和胚胎工程的有關(guān)知識，這些知識常存在內(nèi)在的關(guān)聯(lián)，意在考查學(xué)生對它們內(nèi)在知識相互聯(lián)系的理解運用能力，同時還考查識圖析圖獲取有效信息的能力。