Question

【題目】降鈣素是一種多肽類激素，某科學機構為了研究一種新型降鈣素，從預期新型降鈣素的功能出發(fā)，推測相應的脫氧核苷酸序列，并人工合成了兩條DNA單鏈，兩條鏈形成部分雙鏈DNA片段，再利用Klenow酶補平，獲得雙鏈DNA，過程如圖．在此過程中發(fā)現(xiàn)，合成較長的核苷酸單鏈易產生缺失堿基的現(xiàn)象．分析回答下列問題：
（1）上述制備新型降鈣素，運用的現(xiàn)代生物工程技術是 ． Klenow酶是一種酶．兩條DNA單鏈能合成部分雙鏈DNA的原因是 ．
（2）獲得的雙鏈DNA經限制酶切后插入到大腸桿菌質粒中，篩選含重組質粒的大腸桿菌并進行DNA測序驗證． ①要進行重組質粒的鑒定和選擇，需要大腸桿菌質粒中含有 ．
②導入大腸桿菌時，要用處理．
③經DNA測序表明，最初獲得的多個重組質粒，均未發(fā)現(xiàn)完全正確的基因序列，最可能的原因是 ．

Answer 1

【答案】
（1）蛋白質工程； DNA聚合酶；兩條DNA單鏈中存在互補配對的堿基
（2）標記基因； Ca2+；合成的DNA單鏈較長,堿基發(fā)生了缺失
【解析】解：（1）根據材料中“從預期新型降鈣素的功能出發(fā)，推測相應的脫氧核苷酸序列，獲得雙鏈DNA”，可以確定運用的現(xiàn)代生物工程技術是蛋白質工程．由圖可知Klenow酶能夠將單鏈DNA延伸，可見它是一種DNA聚合酶．由于兩條DNA單鏈中存在互補配對的堿基，因此兩條DNA單鏈能合成部分雙鏈DNA．（2）①基因工程中，重組質粒的鑒定和選擇依靠標記基因．

②大腸桿菌為微生物，作為基因工程的受體細胞，需要用Ca2+處理大腸桿菌，使其處于感受態(tài)．

③如上圖，在合成DNA雙鏈時，如果合成的核苷酸單鏈較長，容易發(fā)生缺失堿基的現(xiàn)象．會引起最初獲得的多個重組質粒，均未發(fā)現(xiàn)完全正確的基因序列的可能．

所以答案是：（1）蛋白質工程 DNA聚合酶 兩條DNA單鏈中存在互補配對的堿基（2）標記基因 Ca2+ 合成的DNA單鏈較長，堿基發(fā)生了缺失

【考點精析】掌握基因工程的原理及技術和蛋白質工程是解答本題的根本，需要知道基因工程的原理是利用DNA重組技術；蛋白質工程是指以蛋白質分子的結構規(guī)律及其生物功能的關系作為基礎，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質進行改造，或制造一種新的蛋白質，以滿足人類的生產和生活的需求．