Question

圖為某種質粒表答載體簡圖，小箭頭所指分別為限制性內切酶EcoRI、BamHI的酶切位點，amp^R為青霉素抗性基因，tct^R為四環(huán)素抗性基因，P為啟動子，T為終止子，ori為復制原點。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI、BamHI在內的多種酶的酶切位點。據圖回答：

（1）將含有目的基因的DNA與質粒該表達載體分別用EcoRI酶切，酶切產物用DNA連接酶進行連接后，其中由兩個DNA片段之間連接形成的產物有__________、__________、__________三種。若要從這些連接產物中分離出__________，需要對這些連接產物進行分離純化。

（2）用上述3種連接產物與無任何抗藥性的原核宿主細胞進行轉化實驗。之后將這些宿主細胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產物是__________；若接種到含青霉素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產物是__________。

（3）目的基因表達時，RNA聚合酶識別和結合的位點是__________，其合成的產物是__________。

（4）在上述實驗中，為了防止目的基因和質粒表達載體在酶切后產生的末端發(fā)生任意連接，酶切時應選用的酶是__________。

Answer 1

答案：
解析：

�。�1）目的基因－載體連接物　載體－載體連接物　目的基因－目的基因連接物　重組質粒（目的基因－載體連接物） 　�。�2）載體－載體連接物　目的基因－載體連接物、載體－載體連接物 　　（3）啟動子（P）　mRNA 　�。�4）EcoRI和BamHI