Question

9．幽門螺桿菌是棲息在胃粘膜的革蘭氏陰性螺旋狀桿菌，細(xì)胞內(nèi)具有強(qiáng)的脲酶（能降解尿素）活性，其代謝類型屬于異養(yǎng)厭氧型，這種細(xì)菌是慢性胃炎、甚至胃癌發(fā)生的元兇．
（1）為了對(duì)胃炎患者的胃粘膜提取物稀釋樣液中的幽門螺桿菌進(jìn)行分離，應(yīng)將樣品稀釋液接種于以尿素為唯一氮源的固體選擇培養(yǎng)基上．
（2）分離培養(yǎng)幽門螺桿菌是必須進(jìn)行無菌操作，包括培養(yǎng)基和各種器皿都必須是無菌的，培養(yǎng)皿常用的滅菌方法是干熱滅菌．采用高壓蒸汽滅菌法要達(dá)到良好的滅菌效果，一般需在壓力為100kPa，溫度為121℃的條件下，維持15-30分鐘．
（3）欲檢測(cè)上述培養(yǎng)基中是否具有幽門螺桿菌這類細(xì)菌的存在，向培養(yǎng)基中添加酚紅指示劑，培養(yǎng)基中菌落周圍顯示紅色環(huán)帶，既表明這類細(xì)菌的存在，這種檢測(cè)過程的原理是脲酶將培養(yǎng)基中的尿素分解成氨，導(dǎo)致培養(yǎng)基pH升高，使酚紅指示劑呈現(xiàn)紅色．
（4）采用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)幽門螺桿菌，為了測(cè)定菌液中的菌體數(shù)量，一般采用稀釋涂布平板法將一定量的菌液接種到固體培養(yǎng)基上，統(tǒng)計(jì)菌落的數(shù)量來代表菌體數(shù)，這種檢測(cè)方法測(cè)得的結(jié)果一般偏�。ㄌ睢按蟆被颉靶　保�，原因是有些活菌在培養(yǎng)過程中死亡、有些菌落是由多個(gè)活菌共同形成的．

Answer 1

分析 1、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落．
2、無菌技術(shù)：消毒和滅菌

	消毒	滅菌
概念	使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外線消毒法	灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌
適用對(duì)象	操作空間、某些液體、雙手等	接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等

解答 解：（1）為了分離具有強(qiáng)的脲酶（能降解尿素）的幽門螺桿菌，應(yīng)將樣品稀釋液接種于以尿素為唯一氮源的固體選擇培養(yǎng)基上．
（2）對(duì)培養(yǎng)皿滅菌常用干熱滅菌法；采用高壓蒸汽滅菌法要達(dá)到良好的滅菌效果，一般需在壓力為100kPa，溫度為121℃的條件下，維持15-30分鐘．
（3）欲檢測(cè)上述培養(yǎng)基中是否具有幽門螺桿菌這類細(xì)菌的存在，向培養(yǎng)基中添加酚紅指示劑，培養(yǎng)基中菌落周圍顯示紅色環(huán)帶，既表明這類細(xì)菌的存在，這種檢測(cè)過程的原理是脲酶將培養(yǎng)基中的尿素分解成氨，導(dǎo)致培養(yǎng)基pH升高，使酚紅指示劑呈現(xiàn)紅色．
（4）接種微生物常用平板劃線法和稀釋涂布平板法，其中稀釋涂布平板法可以對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)；采用這種方法計(jì)數(shù)時(shí)，統(tǒng)計(jì)菌落的數(shù)量來代表菌體數(shù)；由于有些活菌在培養(yǎng)過程中死亡、有些菌落是由多個(gè)活菌共同形成的，因此這種檢測(cè)方法測(cè)得的結(jié)果一般偏�。�
故答案為：
（1）尿素
（2）干熱滅菌      100       121
（3）脲酶將培養(yǎng)基中的尿素分解成氨，導(dǎo)致培養(yǎng)基pH升高，使酚紅指示劑呈現(xiàn)紅色
（4）稀釋涂布平板   菌落    小    有些活菌在培養(yǎng)過程中死亡、有些菌落是由多個(gè)活菌共同形成的

點(diǎn)評(píng) 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記接種微生物常用的方法，掌握無菌技術(shù)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．