Question

6．燒傷病人容易感染綠膿桿菌，引起化膿性感染，比阿培南、美羅培南、頭孢菌素和碳青霉烯類抗生素都是非常經(jīng)典的抗綠膿桿菌的藥物．臨床使用抗生素前，有時需要做細菌耐藥實驗．實驗時，從病人身上獲取少量樣本，按照一定的實驗步驟操作，以確定該病人體內(nèi)的綠膿桿菌對不同抗生素的敏感性．
（1）獲取綠膿桿菌單菌落：配制適于綠膿桿菌生長的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分一般含有碳源、氮源、生長因子、水和無機鹽，調(diào)節(jié)pH至7，滅菌處理，待培養(yǎng)基冷卻至50℃時，在酒精燈火焰附近倒平板．經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得單菌落．
（2）檢測綠膿桿菌對不同抗生素的敏感性：取該單菌落適當稀釋，用涂布平板法法接種于固體培養(yǎng)基表面，使其均勻生長，布滿平板．將分別含等劑量的比阿培南、美羅培南、頭孢菌素和碳青霉烯類抗生素的相同大小的小濾紙圓片均勻置于該平板上的不同位置，適宜條件培養(yǎng)一段時間，結(jié)果是含不同抗生素的濾紙片周圍均出現(xiàn)透明圈，這說明綠膿桿菌對上述抗生素敏感；含頭抱菌素的濾紙片周圍的透明圈比含美羅培南的小，這說明綠膿桿菌對頭孢菌素的敏感性比美羅培南弱；含比阿培南、碳青霉烯類的濾紙片周圍的透明圈也比含美羅培南的小，且比阿培南透明圈中出現(xiàn)了一個菌落，請推測此菌落產(chǎn)生的可能原因：一是雜菌污染，二是抗比阿培南的綠膿桿菌（或綠膿桿菌產(chǎn)生耐藥性突變）形成的菌落．
（3）根據(jù)上述實驗結(jié)果，為達到抗綠膿桿菌的目的，對于該患者來說最好應選用抗生素美羅培南．

Answer 1

分析 根據(jù)題意：該實驗的目的是探究病人體內(nèi)的綠膿桿菌對不同抗生素的敏感性，實驗的自變量的抗生素的種類，培養(yǎng)基的基本成分、培養(yǎng)條件等屬于無關變量，綠膿桿菌的生長狀況是因變量；實驗的原理是將綠膿桿菌稀釋液涂布到固體培養(yǎng)基表面，使其均勻生長，布滿平板．將分別含等劑量的比阿培南、美羅培南、頭抱菌素和碳青霉烯類抗生素的同大小的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，適宜條件培養(yǎng)一段時間，如果抗生素對于該菌具有抑制作用，該菌在含有抗生素的地方不能正常的生長，會出現(xiàn)透明圈，根據(jù)透明圈的大小判斷抑菌效果，透明圈越大，抑菌效果越好．

解答 解：（1）獲取綠膿桿菌單菌落：培養(yǎng)基的成分一般都含有碳源、氮源、水和無機鹽；倒平板時為了防止雜菌污染應該在酒精燈火焰附近倒平板．
（2）檢測綠膿桿菌對不同抗生素的敏感性：取該單菌落適當稀釋，用稀釋涂布平板法種于固體培養(yǎng)基表面；將分別含等劑量的比阿培南、美羅培南、頭抱菌素和碳青霉烯類抗生素的同大小的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，適宜條件培養(yǎng)一段時間，如果含不同抗生素的濾紙片周圍均出現(xiàn)透明圈，說明綠膿桿菌對比阿培南、美羅培南、頭抱菌素和碳青霉烯類抗生素都敏感；如果含頭抱菌素的濾紙片周圍的透明圈比含美羅培南的小，則說明綠膿桿菌對頭孢菌素面敏感性比對美羅培南弱；如果
比阿培南透明圈中出現(xiàn)了一個菌落，可能的原因是雜菌污染，或者是綠膿桿菌產(chǎn)生耐藥性突變個體形成的菌落．
（3）分析（2）中 的實驗結(jié)果可知，該病人體內(nèi)的綠膿桿菌對美羅培南最敏感，是該病人首選的抗生素．
故答案為：
（1）碳源   酒精燈火焰     
（2）涂布平板法     敏感   綠膿桿菌對頭孢菌素的敏感性比美羅培南弱
雜菌污染   抗比阿培南的綠膿桿菌（或綠膿桿菌產(chǎn)生耐藥性突變）形成的菌落
（3）美羅培南

點評 對于微生物實驗室培養(yǎng)的掌握、應用相關知識解決實際問題、并分析實驗結(jié)果獲取結(jié)論是本題考查的重點．解答本題的關鍵是判斷出如果抗生素對于該菌具有抑制作用，該菌在含有抗生素的地方不能正常的生長，會出現(xiàn)透明圈，根據(jù)透明圈的大小判斷抑菌效果．