Question

普通棉花中含β-甘露糖苷酶基因（GhMnaA2），能在纖維細(xì)胞中特異性表達(dá)，產(chǎn)生的β-甘露糖苷酶催化半纖維素降解，棉纖維長(zhǎng)度變短。為了培育新的棉花品種，科研人員構(gòu)建了反義GhMnaA2基因表達(dá)載體，利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入棉花細(xì)胞，成功獲得轉(zhuǎn)基因棉花品種，具體過(guò)程如下。請(qǐng)分析回答：

（1）①和②過(guò)程中所用的限制性?xún)?nèi)切酶分別是____________________、____________________。

（2）基因表達(dá)載體除了圖示組成外，至少還有____________________等（至少答兩個(gè)）。

（3）③過(guò)程中用酶切法可鑒定正、反義表達(dá)載體。用SmaⅠ酶和NotⅠ酶切正義基因表達(dá)載體獲得0.05kb、3.25kb、5.95kb、9.45kb四種長(zhǎng)度的DNA片段，則用NotⅠ酶切反義基因表達(dá)載體獲得DNA片段的長(zhǎng)度應(yīng)是____________________和____________________。

（4）④過(guò)程中利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化棉花細(xì)胞的過(guò)程中，整合到棉花細(xì)胞染色體DNA的區(qū)段是____________________，轉(zhuǎn)化后的細(xì)胞再通過(guò)____________________形成植物體。

（5）導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)的反義GhMnaA2轉(zhuǎn)錄的mRNA能與細(xì)胞內(nèi)的GhMnaA2轉(zhuǎn)錄的mRNA互補(bǔ)配對(duì)，從而抑制基因的表達(dá)，其意義是____________________。

Answer 1

【參考答案】

（1）HindⅢ、BamHⅠ   SmaⅠ（2）復(fù)制原點(diǎn)、終止子、標(biāo)記基因等（3）6.0kb  12.7kb

（4）（含有E6啟動(dòng)子和GhMnaA2基因的）T－DNA     植物組織培養(yǎng)

（5）阻止β-甘露糖苷酶合成，使棉纖維更長(zhǎng)