Question

回答下列（一）、（二）小題：

（一）普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人將地衣芽孢桿菌的α-淀粉酶基因轉(zhuǎn)入酵母菌中，經(jīng)篩選得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種（過程如圖1所示）

（1）圖1中,為達到篩選目的,平板內(nèi)的固體培養(yǎng)基應(yīng)以 作為唯一碳源。②、③過程需重復(fù)幾次,目的是 。

（2）某同學(xué)嘗試過程③的操作,其中一個平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖2所示。該同學(xué)的接種方法是 ；推測該同學(xué)接種時可能的操作失誤是 。

（3）以淀粉為原料,用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的適宜條件下密閉發(fā)酵,發(fā)酵罐需要先排氣,其原因是 。

（4）上述工程酵母菌培養(yǎng)過程中，有關(guān)操作正確的是

A．玻璃刮刀用火焰灼燒進行滅菌

B．培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進行滅菌

C．倒平板和取菌液都必須在酒精燈火焰旁進行

D．獲得的菌種如果需要保存，可置于37℃恒溫保存

（二）下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖1、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點。請回答下列問題：

（1）用圖中質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒，應(yīng)選用 兩種限制酶切割，酶切后的載體和目的基因片段，通過 酶作用后獲得重組質(zhì)粒。

（2）為了篩選出轉(zhuǎn)入了重組質(zhì)粒的大腸桿菌，應(yīng)在篩選平板培養(yǎng)基中添加 。

（3）若BamH I酶切的DNA末端與Bcl I酶切的DNA末端連接，連接部位的6個堿基對序列為 ，對于該部位，這兩種酶 （填“都能”、“都不能”或“只有一種能”）切開。

（4）若用Sau3A I切圖1質(zhì)粒最多可能獲得 種大小不同的DNA片段。

（5）基因工程中，某些噬菌體經(jīng)改造后可以作為載體，其DNA復(fù)制所需的原料來自于 。

Answer 1