Question

哺乳動物成熟的紅細胞中含有大量血紅蛋白，紅細胞的機能主要就是由血紅蛋白完成的。我們選用豬、牛、羊等動物的血液來提取和分離血紅蛋白，請回答下列有關問題：

（1）實驗前取新鮮的血液，要切記在采血容器中預先加入檸檬酸鈉，取血回來，馬上進行離心，收集血紅蛋白溶液。此過程即是樣品處理，它應包括紅細胞洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液。

①其中加入檸檬酸鈉的目的是___________________。

②洗滌紅細胞的目的是__________________ ___。洗滌后的紅細胞多數(shù)要置于　　 中，可以使細胞　　　　　　 。

（2）收集的血紅蛋白溶液在透析袋中透析，這就是樣品的粗分離。

①透析的目的是____________________________________________。

②透析的原理是_______________________________________________。

（3）然后通過凝膠色譜法將樣品進一步純化，最后經(jīng)SDS—聚丙烯酰胺凝膠電脈進行純度鑒定。其中通過凝膠色譜法將樣品純化的目的是___________________________。

 

Answer 1

（1）①防止血液凝固　　 ②去除雜蛋白 蒸餾水 吸水脹破

（2）去除相對分子質量較小的雜質　 透析袋能使小分子自由進出，而大分子蛋白質則保留在袋內(nèi)

（3）通過凝膠色譜法去除相對分子質量較大的雜質

 

（1）檸檬酸鈉是一種抗凝劑，加入檸檬酸鈉可以防止血液凝固；洗滌紅細胞的目的是去除血液中的雜蛋白，以利于后續(xù)步驟的分離純化。（2）透析袋一般是用硝酸纖維素制成的，透析袋能使小分子自由進出，而將大分子保留在袋內(nèi)，透析可以去除樣品中分子量較小的雜質或用于更換樣品的緩沖液。（3）凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質量的大小分離蛋白質的方法，因此通過凝膠色譜法去除相對分子質量較大的雜質。