Question

13．基因治療是指將外源正常基因導入靶細胞，以糾正或補償因基因缺陷和異常引起的疾病，以達到治療的目的．干擾素基因缺失的小鼠不能產生成熟淋巴細胞，科研人員利用胚胎干細胞（ES細胞）對干擾素基因缺失的小鼠進行了基因治療．請回答：
（1）為使干擾素基因在小鼠細胞中高效表達，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入基因表達載體的啟動子和終止子之間．
（2）將干擾素基因導入ES細胞的方法是顯微注射技術，采用DNA分子雜交可以鑒定目的基因是否插入到受體細胞染色體DNA分子上，再將能正常表達干擾素的細胞轉入到小鼠體內，這種治療方法稱為體外基因治療．導入ES細胞而不是導入上皮細胞是因為ES細胞在功能上具有發(fā)育的全能性．
（3）干擾素基因缺失的小鼠易患某種細菌導致的肺炎，引起這種現(xiàn)象的原因是小鼠缺少成熟的淋巴細胞，降低了小鼠免疫系統(tǒng)的防衛(wèi)功能．
（4）用于基因治療的基因有三類，一類是把正常基因導入有基因缺陷的細胞中，以表達出正常性狀來治療，第二類是反義基因，即通過產生的mRNA分子與病變基因產生的mRNA進行互補結合，來阻斷非正常蛋白質的合成；第三類是編碼可以殺死癌細胞的蛋白酶基因．

Answer 1

分析 1、基因表達載體包括啟動子、終止子、目的基因和標記基因．啟動子位于目的基因的首端，終止子位于目的基因的尾端
2、目的基因的檢測與鑒定：
（1）分子水平上的檢測：
①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；
②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；
③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．
（2）個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
3、反義基因，即通過產生的mRNA分子，與病變基因產生的mRNA進行互補，來阻止合成非正常蛋白質．

解答 解：（1）基因表達載體包括啟動子、終止子、目的基因和標記基因．啟動子位于目的基因的首端，終止子位于目的基因的尾端．因此，為使干擾素基因在小鼠細胞中高效表達，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入基因表達載體的啟動子和終止子之間．
（2）在基因工程中，受體細胞是動物細胞，因此將干擾素基因導入ES細胞的方法是顯微注射技術．檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因的方法是DNA分子雜交技術；將能正常表達干擾素的細胞轉入到小鼠體內，這種治療方法稱為體外基因治療；ES細胞在功能上具有發(fā)育的全能性．
（3）小鼠缺少成熟的淋巴細胞，降低了患者免疫系統(tǒng)的防衛(wèi)功能．
（4）反義基因，即通過產生的mRNA分子，與病變基因產生的mRNA進行互補，來阻止合成非正常蛋白質．
故答案為：
（1）啟動子    終止子
（2）顯微注射技術  DNA分子雜交    體外基因治療    發(fā)育的全能性
（3）防衛(wèi)
（4）mRNA

點評 本題考查基因工程、免疫系統(tǒng)等相關知識，要求考生熟記基因工程的原理、操作工具及操作步驟，意在考查考生的識記能力和應用能力，屬于容易題．但是掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)問題，能結合所學的知識準確答題．