Question

科學家從某些能無限增殖細胞的細胞質中分離出無限增殖調控基因（prG），該基因能激發(fā)許多動物的細胞進行分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更為廣闊的前景．請回答以下問題．
（1）利用雜交瘤技術制備單克隆抗體，促進動物細胞融合常用的誘融劑是

 

，誘融后需進行兩次篩選，第一次篩選的目的是

 

，第二次篩選的目的是

 

．
（2）有人提出，將無限增殖調控基因（prG）直接導入B細胞亦能獲得單克隆抗體，其思路如圖甲所示．
①制備重組質粒．
②將重組質粒導入細胞“Ⅱ”，Ⅱ所指的細胞是

 

，然后進行“檢測”，其目的是

 

．Ⅲ所指的細胞具有的特點是

 

．
（3）也有人提出用細胞核移植技術構建重組細胞來制備單克隆抗體，其思路如圖乙所示．
①構建重組細胞時，只選用了細胞甲的細胞質是因為

 

．
②選取

 

的細胞核進行移植．
③重組細胞進行體外細胞培養(yǎng)時應為細胞增殖提供

 

等營養(yǎng)物質，通過細胞培養(yǎng)獲得的細胞群稱為

 

．

Answer 1

考點：單克隆抗體的制備過程,動物細胞核移植技術

專題：

分析：據圖甲分析，用酶A（限制酶）處理供體DNA分離出無限增殖調控基因，用同種酶切割質粒形成相同的黏性末端，用酶B（DNA連接酶）處理形成重組質粒，導入Ⅱ（效應B細胞），形成重組細胞Ⅲ．圖乙表示核移植技術，去掉無限增殖細胞的細胞核，移植B淋巴細胞的細胞核，形成雜種細胞．

解答： 解：（1）利用雜交瘤技術制備單克隆抗體，誘融劑是PEG促進動物細胞融合，誘融后需進行兩次篩選，第一次篩選出雜交瘤細胞，第二次篩選出既能無限增殖又能產生所需抗體的雜交瘤細胞．
（2）分析圖甲，將無限增殖調控基因（prG）直接導入B細胞，能獲得單克隆抗體．
①制備的重組質粒中含有的目的基因無限增殖調控基因．
②將重組質粒導入細胞Ⅱ，即效應B細胞，接著采用抗原-抗體雜交的方法檢測目的基因在受體細胞中能否表達．重組細胞Ⅲ是能無限增殖，又能產生特定抗體的效應B細胞．
（3）分析圖乙，用細胞核移植技術構建重組細胞來制備單克隆抗體．
①構建重組細胞時，用無限增殖細胞的細胞質，因為細胞質中有無限增殖調控基因（prG）．
②選取效應B細胞的細胞核進行移植．
③重組細胞進行體外細胞培養(yǎng)，提供水、無機鹽、碳源、氮源、動物血清等營養(yǎng)物質，雜種細胞能無限繁殖，獲得的細胞群稱為細胞系．
故答案為：
（1）PEG（聚乙二醇、滅活的病毒）  篩選出雜交瘤細胞    篩選出既能無限增殖又能產生所需抗體的雜交瘤細胞
（2）效應B細胞  檢測目的基因在受體細胞中能否表達（檢測受體細胞是否顯示出目的基因所控制的性狀）    即能無限增殖又能產生特定抗體的效應B細胞
（3）①細胞甲的細胞質中有無限增殖調控基因（prG）    
②效應B細胞 水、無機鹽、碳源、氮源、動物血清    
③細胞系

點評：本題考查基因工程、核移植技術、單克隆抗體制備的相關知識，意在考查學生的識圖能力和判斷能力，運用所學知識綜合分析問題和解決問題的能力．