Question

15．如圖為限制酶BamHⅠ和BglⅡ的識別序列及切割位點，實驗中用BamHⅠ切割DNA獲得目的基因，用BglⅡ切割質粒，并將它們拼接得到重組質粒．下列相關敘述正確的是（　　）

• A． 在酶切過程中，要控制好酶的濃度、溫度和反應速率等因素
• B． 經兩種酶處理得到的重組質粒不能再被這兩種酶所識別
• C． 目的基因經BglⅡ切割后形成的黏性末端是-CTACG
• D． 分別用兩種限制酶切割，保證了目的基因定向的插入質粒

Answer 1

分析 “分子手術刀”--限制性核酸內切酶（限制酶）
（1）來源：主要是從原核生物中分離純化出來的．
（2）功能：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性．
（3）結果：經限制酶切割產生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端．

解答 解：A、影響酶促反應的因素有溫度、PH、酶濃度、底物濃度等，因此酶切過程中，需控制好酶濃度、溫度和反應時間等因素，A錯誤；
B、經兩種酶處理得到的重組質粒不能再被這兩種酶所識別，B正確；
C、目的基因經BglⅡ切割后形成的黏性末端是-CTAG，C錯誤；
D、分別用兩種限制酶切割，由于形成的黏性末端相同，因此并不能保證目的基因定向插入質粒，D錯誤．
故選：B．

點評 本題考查了基因工程的有關知識，要求考生能夠掌握限制酶的作用特點，根據(jù)題干信息判斷兩種酶切割后的黏性末端是否能發(fā)生重組以及連接的方式，同時要求考生能夠寫出切割后形成的黏性末端以及連接后的堿基序列，再結合題干信息準確判斷各項．