Question

15．將蘇云金桿菌Bt蛋白的基因導入棉花細胞中，可獲得抗棉鈴蟲的轉基因棉，其過程如下圖所示（注：農桿菌中Ti質粒上只有T-DNA片段能轉移到植物細胞中）．

（1）過程①需用同種限制酶對含Bt基因的DNA和Ti質粒進行酶切．過程②應使用選擇培養(yǎng)基的目的是為了獲得含重組質粒的農桿菌．
（2）過程③中將棉花細胞與農桿菌混合后共同培養(yǎng)，旨在讓T-DNA進入棉花細胞；除盡農桿菌后，還須轉接到含卡那霉素的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)，目的是篩選獲得含T-DNA片段的植物細胞．
（3）若過程④僅獲得大量的芽，則應在培養(yǎng)基中增加一定量的生長素以獲得根；部分接種在無激素培養(yǎng)基上的芽也能長根，原因是頂芽合成的生長素向基部運輸，促進根的分化．
（4）過程③④⑤運用了細胞工程中的植物組織培養(yǎng)技術，該技術的理論依據是細胞的全能性；在該技術應用的過程中，關鍵步驟是利用含有一定營養(yǎng)和激素的培養(yǎng)基誘導植物細胞進行脫分化和再分化．
（5）檢驗轉基因棉的抗蟲性狀，常用方法是投放棉鈴蟲（或答抗蟲接種實驗）．種植轉基因抗蟲棉能減少農藥的使用，以減輕環(huán)境污染．

Answer 1

分析 根據題意和圖示分析可知：圖示為轉基因抗蟲棉的培育過程圖，主要包括：①基因表達載體的構建；②將目的基因導入受體細胞（采用農桿菌轉化法）；③將棉花細胞與農桿菌混合后共同培養(yǎng)，并脫分化形成愈傷組織，④再分化，將離體棉花植株培育成抗蟲棉還需采用植物組織培養(yǎng)技術．

解答 解：（1）過程①表示基因表達載體的構建，該過程需用同種限制酶對含Bt基因的DNA和Ti質粒進行酶切．過程②應使用選擇培養(yǎng)基的目的是為了獲得含重組質粒的農桿菌．
（2）過程③中將棉花細胞與農桿菌混合后共同培養(yǎng)的目的是讓T-DNA進入棉花細胞，卡那霉素作用是篩選獲得T-DNA片段的植物細胞．
（3）生長素能夠促進根的分化，細胞分裂素能夠促進芽的分化．若過程④僅獲得大量的芽，則應在培養(yǎng)基中增加一定量的生長素以獲得根；同時芽頂端合成的生長素向基部運輸，促進根的分化．
（4）過程③④⑤運用了細胞工程中的植物組織培養(yǎng)技術，該技術的理論依據是細胞的全能性；在該技術應用的過程中，關鍵步驟是利用含有一定營養(yǎng)和激素的培養(yǎng)基誘導植物細胞進行脫分化 和  再分化．
（5）檢驗轉基因棉的抗蟲性狀，常用方法是投放棉鈴蟲，若棉鈴蟲大量死亡，說明轉基因成功．種植轉基因抗蟲棉能減少農藥的使用，以減輕環(huán)境污染．
故答案為：
（1）含Bt基因的DNA和Ti質粒    獲得含重組質粒的農桿菌
（2）T-DNA   篩選獲得含T-DNA片段的植物細胞
（3）一定量的生長素    頂芽合成的生長素向基部運輸，促進根的分化
（4）植物組織培養(yǎng)      細胞的全能性   脫分化  再分化
（5）投放棉鈴蟲（或答抗蟲接種實驗）   農藥

點評 本題結合抗蟲棉的培育過程圖，考查基因工程、植物組織培養(yǎng)、基因分離定律的實質及應用，要求考生識記基因工程的原理、工具、操作步驟和應用．