Question

2．雅安市城區(qū)居民用水取自于青衣江上游，為保障居民用水安全，相關單位需要定期檢測水源中細菌種類及數(shù)量，以確定水質是否達標．請回答下列問題：
（1）制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的步驟是計算→稱量→熔化→滅菌→倒平板．其中對培養(yǎng)基滅菌的方法是
高壓蒸汽滅菌．為避免雜菌污染，倒平板時應當在酒精燈火焰旁進行．
（2）培養(yǎng)基中的牛肉膏主要為細菌提供碳源、氮源（無機鹽）營養(yǎng)成分．培養(yǎng)細菌的pH應調節(jié)至中性或微堿性．
（3）要統(tǒng)計水源中的活菌總數(shù)，應該采用的方法是稀釋涂布平板法．工作者將三個接種了等量水源水的培養(yǎng)基置于37℃的恒溫箱中培養(yǎng)．24小時后觀察到三個平板上的菌落數(shù)目為21、256、215，請分析結果出現(xiàn)的可能原因并提供解決方案：原因：涂布第一個平板時涂布器未冷卻就涂布平板（后兩個平板被污染；操作失誤）；方案：重做實驗．

Answer 1

分析 1、制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟是計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板．
2、微生物接種的核心是防止雜菌的污染，保證培養(yǎng)物的純度．無菌技術的主要內(nèi)容：
①對實驗操作的空間、操作者的衣著和手，進行清潔和消毒；
②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進行滅菌
③為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應在酒精燈火焰附近進行；
④實驗操作時應避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸．

解答 解：（1）制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的步驟是計算→稱量→熔化→滅菌→倒平板．其中對培養(yǎng)基滅菌的方法是高壓蒸汽滅菌．為避免雜菌污染，倒平板時應當在酒精燈火焰旁進行．
（2）培養(yǎng)基中的牛肉膏主要為細菌提供碳源、氮源（無機鹽）等營養(yǎng)成分．培養(yǎng)細菌的pH應調節(jié)至中性或微堿性．
（3）要統(tǒng)計水源中的活菌總數(shù)，應該采用稀釋涂布平板法．根據(jù)題干信息可知，第一個平板菌落數(shù)偏低，可能是涂布第一個平板時涂布器未冷卻就涂布平板；后兩個平板菌落數(shù)偏高，因此也可能是后兩個平板被污染，因此最好重復實驗．
故答案為：
（1）倒平板     高壓蒸汽滅菌      酒精燈火焰旁
（2）碳源、氮源（無機鹽）      中性或微堿性
（3）稀釋涂布平板法      原因：涂布第一個平板時涂布器未冷卻就涂布平板；（后兩個平板被污染；操作失誤）（其他合理答案均可）方案：重做實驗

點評 本題考查微生物分離和培養(yǎng)的有關知識，要求考生能夠識記培養(yǎng)基的成分，掌握培養(yǎng)基制備的一般步驟，能夠對實驗結果中出現(xiàn)的異�，F(xiàn)象進行原因分析，并提供解決方案．