Question

【題目】[生物——選修3：現(xiàn)代生物科技專題]家蠶細胞具有高效表達外源基因的能力，科學家將人干擾素基因?qū)�入家蠶細胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取干擾素用于制藥。請回答下列相關問題：

（1）進行轉(zhuǎn)基因操作前，需用_________酶短時處理幼蠶組織，以便獲得單個細胞。在培養(yǎng)動物細胞時，培養(yǎng)液中需要通入CO2，作用是_________。

（2）為使干擾素基因在家蠶細胞中高效表達，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達載體的_________和___________之間。

（3）采用PCR技術可驗證干擾素基因是否已經(jīng)導入家蠶細胞。PCR反應體系的主要成分應該包含：擴增緩沖液（含Mg2+）、水，4種脫氧核苷酸、模板DNA、能量、____和______。

（4）利用生物反應器培養(yǎng)家蠶細胞時，貼滿瓶壁的細胞會產(chǎn)生________現(xiàn)象。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應器中，這樣可以增大_________，從而增加培養(yǎng)的細胞數(shù)量，也有利于空氣交換。

Answer 1

【答案】 胰蛋白酶（或膠原蛋白酶） 維持pH值的穩(wěn)定 啟動子 終止子 TaqDNA聚合酶（熱穩(wěn)定DNA聚合酶） 引物 接觸抑制 增大細胞貼壁生長的附著面積

【解析】試題分析：梳理動物細胞培養(yǎng)、基因工程的相關知識，從題意中提取有效信息，進行相關問題的解答。

(1)為使動物組織分散開，獲得單個細胞，通常用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理。在培養(yǎng)動物細胞過程中，培養(yǎng)液中通入的CO2的作用是：維持pH值的穩(wěn)定。

(2)啟動子位于目的基因的首端，終止子位于目的基因的尾端 ，因此在構建基因表達載體時，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達載體的啟動子和 終止子之間。

(3) 采用PCR技術擴增目的基因時，PCR反應體系的主要成分應該包含：擴增緩沖液（含Mg2+）、水、4種脫氧核苷酸、模板DNA、能量、TaqDNA聚合酶（熱穩(wěn)定DNA聚合酶）和引物。

(4) 動物細胞離體培養(yǎng)時，貼滿瓶壁的細胞會產(chǎn)生接觸抑制現(xiàn)象。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應器中，這樣可以增大細胞貼壁生長的附著面積，從而增加培養(yǎng)的細胞數(shù)量，也有利于空氣交換。