Question

【題目】據(jù)英國每日郵報報道，科研人員偶然篩選出一種可以“吃塑料”的細菌（F6菌），它能夠在30℃下經(jīng)過6個星期完全降解PET（聚對苯二甲酸乙二醇酯）薄膜。進一步研究發(fā)現(xiàn)，這種細菌以PET作為碳源，其中ISF6酶在降解過程中起著決定性的作用。請回答下列問題：

（1）根據(jù)報道信息可知，要篩選出F6菌，必須配制以______________作為唯一碳源的固體培養(yǎng)基，該選擇培養(yǎng)基中應(yīng)添加____________________________以使其呈固態(tài)，在培養(yǎng)基各成分溶化后分裝前，應(yīng)進行__________________和滅菌。

（2）為保證培養(yǎng)基上能均勻地生長出一層F6菌，首先需要用_______________對樣液進行梯度稀釋，然后取不同稀釋度的樣品各0. 1mL涂布到固體培養(yǎng)基上，將平板_____________后放入恒溫箱培養(yǎng)。PET粉末呈白色，不溶于水。F6菌將PET降解后，高效降解PET的F6菌菌落周圍會出現(xiàn)__________________。若接種24h后發(fā)現(xiàn)某個培養(yǎng)基上沒有任何菌落生長，則最可能的原因是___________________________________。

（3）實驗結(jié)束后，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進行______________處理后，才能扔掉。

Answer 1

【答案】PET（或聚對苯二甲酸乙二醇酯） 瓊脂（等凝固劑） 調(diào)節(jié)pH 無菌水 倒置 大的透明圈 涂布器灼燒后未冷卻就用于涂布，殺死了菌種 滅菌

【解析】

培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽。培養(yǎng)基的分類：①按物理性質(zhì)分，分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基中含有凝固劑，一般是瓊脂；②按化學成分分，分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)，兩者的區(qū)別是天然培養(yǎng)基成分不確定，合成培養(yǎng)基成分的含量是確定的；③按用途分，分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基主要是培養(yǎng)、分離特定的微生物，培養(yǎng)酵母菌可在培養(yǎng)基中加入青霉素；鑒別培養(yǎng)基可以鑒定不同的微生物，比如鑒別飲用水中是否含有大腸桿菌，可以用伊紅美藍培養(yǎng)基，如果菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤，說明有大腸桿菌。

(1) 由于“吃塑料”的細菌使用PET作為能量源，故該固體培養(yǎng)基應(yīng)以PET作為唯一能量源。制備固體培養(yǎng)基需添加瓊脂等凝固劑。在培養(yǎng)基各成分溶化后分裝前，應(yīng)該先調(diào)pH再滅菌。

（2）稀釋涂布平板法需要用無菌水對樣液進行梯度稀釋，培養(yǎng)細菌時，需將平板倒置以防止培養(yǎng)皿蓋上形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基。這種細菌將PET降解后，含有該指示劑的培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以這種細菌為中心的透明圈。在稀釋涂布平板法過程中，若涂布器灼燒后未冷卻就用于涂布，能殺死菌種，使得培養(yǎng)基上沒有任何菌落生長。

（3）實驗結(jié)束后，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進行滅菌處理，防止污染環(huán)境和實驗者本身。