Question

【題目】Bt基因即蘇云金芽孢桿菌(Badcillusthuringiensis，簡(jiǎn)稱Bt)基因，因其表達(dá)產(chǎn)物Bt毒蛋白殺蟲效果好、安全、高效等優(yōu)點(diǎn)而成為應(yīng)用最為廣泛的轉(zhuǎn)殺蟲基因。如圖為培育轉(zhuǎn)Bt基因苗的基本操作過(guò)程。

（1）Bt基因可從構(gòu)建的Bt基因組文庫(kù)中獲取，也可以從其cDNA文庫(kù)中獲取，從前者獲取的基因__________（填“含有”或“不含有”）啟動(dòng)子。若利用PCR技術(shù)擴(kuò)增Bt基因，此過(guò)程中Taq酶所起的作用是____________________________________。

（2）步驟IV中產(chǎn)生的細(xì)胞團(tuán)稱為________________，步驟IV和V過(guò)程要注意控制培養(yǎng)基中_____________________________的濃度比例，以便獲得幼苗。

（3）我國(guó)西北的一些地區(qū)年降雨量很小，只適宜種植少數(shù)的草本植物，但卻被硬性規(guī)定種植轉(zhuǎn)Bt基因的植物，結(jié)果造成減產(chǎn)。這個(gè)案例主要違背了生態(tài)工程的_______________原理。

（4）蛋白質(zhì)工程也被稱為_________________，其基本途徑是從_______________出發(fā)，通過(guò)設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列，進(jìn)而找到相對(duì)應(yīng)的_______________，據(jù)此獲得基因，再經(jīng)表達(dá)、純化獲得蛋白質(zhì)，之后還需要對(duì)蛋白質(zhì)的生物功能進(jìn)行鑒定。

Answer 1

【答案】含有保證在高溫條件下從引物起始進(jìn)行DNA子鏈的合成愈傷組織生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素協(xié)調(diào)與平衡第二代基因工程預(yù)期的蛋白質(zhì)功能脫氧核苷酸序列

【解析】

1、步驟Ⅰ是剪切幼齡葉片的部分組織；步驟Ⅱ是外植體消毒；步驟Ⅲ是利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞；步驟Ⅳ是在適宜培養(yǎng)基中誘導(dǎo)外植體脫分化形成愈傷組織。步驟Ⅴ是愈傷組織經(jīng)過(guò)再分化形成植株。

2、蛋白質(zhì)工程的流程圖如下圖所示

（1）Bt基因組文庫(kù)包括蘇云金芽孢桿菌的全部基因，是包含啟動(dòng)子的。若利用PCR技術(shù)擴(kuò)增Bt基因，Taq酶能夠保證在高溫條件下從引物起始進(jìn)行DNA子鏈的合成。

（2）步驟IV在適宜培養(yǎng)基中誘導(dǎo)外植體脫分化形成愈傷組織，圖示中的細(xì)胞團(tuán)稱為愈傷組織。步驟IV和V過(guò)程分別是脫分化和再分化的過(guò)程，需要要注意控制培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的濃度比例，以便獲得幼苗。

（3）生態(tài)工程的原理包括物質(zhì)循環(huán)再生原理、物種多樣性原理、協(xié)調(diào)與平衡原理、整體性原理、體統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理、系統(tǒng)整體性原理。我國(guó)西北的一些地區(qū)不適合種植轉(zhuǎn)Bt基因的植物，卻被硬性規(guī)定種植，結(jié)果造成減產(chǎn)的案例主要違背了生態(tài)工程的協(xié)調(diào)與平衡原理。

（4）由于蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的，在技術(shù)方面有很多同基因工程技術(shù)相似的地方，因此也被稱為第二代基因工程。其基本途徑是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，通過(guò)設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列，進(jìn)而找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列，據(jù)此獲得基因，再經(jīng)表達(dá)、純化獲得蛋白質(zhì)，之后還需要對(duì)蛋白質(zhì)的生物功能進(jìn)行鑒定。