Question

3．研究人員將魚的抗凍基因?qū)�入番茄體內(nèi)，獲得抗凍能力明顯提高的番茄新品種．下列操作合理的是（　　）

• A． 設(shè)計(jì)相應(yīng)DNA單鏈片段作為引物利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因
• B． 利用限制性核酸內(nèi)切酶和DNA聚合酶構(gòu)建基因表達(dá)載體
• C． 將基因表達(dá)載體導(dǎo)入番茄體細(xì)胞之前需用Ca²⁺處理細(xì)胞
• D． 運(yùn)用DNA分子雜交技術(shù)檢測(cè)抗凍基因是否在番茄細(xì)胞中表達(dá)

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
1、目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．3、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
4、目的基因的檢測(cè)與鑒定：（1）分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．（2）個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：A、獲取抗凍基因時(shí)，可設(shè)計(jì)相應(yīng)DNA單鏈片段作為引物，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，A正確；
B、利用限制酶和DNA連接酶構(gòu)建基因表達(dá)載體，B錯(cuò)誤；
C、將基因表達(dá)載體導(dǎo)入番茄細(xì)胞的方法有基因槍法、花粉管通道法、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，這三種方法都不需用Ca²⁺處理細(xì)胞，受體細(xì)胞是微生物時(shí)，需要用Ca²⁺處理細(xì)胞，使其處于感受態(tài)，C錯(cuò)誤；
D、運(yùn)用DNA分子雜交技術(shù)檢測(cè)抗凍基因是否導(dǎo)入番茄細(xì)胞中，但不能檢測(cè)抗凍基因是否在番茄細(xì)胞中表達(dá)，D錯(cuò)誤．
故選：A．

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的原理及技術(shù)，做題關(guān)鍵是要求考生熟悉掌握基因工程的原理、工具、操作步驟，掌握目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的方法以及目的基因檢測(cè)與鑒定的方法，能運(yùn)用所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)．