Question

【題目】現(xiàn)有甲、乙兩種可能有一定致畸、致癌作用的化學物質，利用動物細胞培養(yǎng)的方法能夠鑒定它們是否有毒性，并比較二者毒性的強弱：請完成下列實驗報告。

I．實驗材料：小白鼠胚胎。

Ⅱ．藥品用具：胰蛋白酶液、動物細胞培養(yǎng)液、動物細胞固定液、適宜濃度的龍膽紫溶液、滴管、培養(yǎng)皿、剪刀、錐形瓶、細胞培養(yǎng)箱、載玻片、蓋玻片、光學顯微鏡、小白鼠正常體細胞有絲分裂高倍顯微鏡照片。

Ⅲ．實驗原理： ，根據(jù)這些變異細胞占全部培養(yǎng)細胞的百分數(shù)（以下稱Q值），可判斷該化學物質的毒性。

Ⅳ．實驗步驟：

（1）制備細胞懸液：把小白鼠胚胎放在培養(yǎng)皿中剪碎，轉入錐形瓶中，加人胰蛋白酶液處理，使胚胎組織離散成單個細胞，再加入動物細胞培養(yǎng)液，制成細胞懸液。

（2）進行細胞培養(yǎng)：

①取A、B、C三個潔凈的培養(yǎng)瓶， 。

② 。

③ 。

（3）制作臨時裝片：

①當細胞繁殖到大約第8代左右時，同時從細胞培養(yǎng)箱中取出三個培養(yǎng)瓶，用胰蛋白酶液處理，使培養(yǎng)的細胞從瓶壁上脫落，再加入動物細胞固定液迅速殺死細胞，將細胞固定在不同的分裂時期。

②靜置一段時間后，分別從各培養(yǎng)瓶底部吸取適量的細胞懸液。滴在與培養(yǎng)瓶有相同編號的載玻片中央，加1—2滴一定濃度的 染色，3—5 min后，蓋上蓋玻片，制成臨時裝片。

（4）鏡檢和統(tǒng)計：把臨時裝片放在顯微鏡下，尋找處于有絲分裂中期的細胞，并與 對比以確認發(fā)生上述變異的細胞，同時統(tǒng)計該期變異的細胞占細胞總數(shù)的百分數(shù)（Q值）。

V．實驗結果：

培養(yǎng)瓶	A	B	C
Q值	1．3%	12．5%	0．1%

Ⅵ．實驗結論： 。

Answer 1

【答案】Ⅲ．將有毒物質加入細胞培養(yǎng)液后，培養(yǎng)的動物細胞會發(fā)生染色體數(shù)量和結構變異（答出有毒物質使細胞發(fā)生變異）

Ⅳ．（2）①分別加入等量的細胞懸液（2分）

②向A、B兩個培養(yǎng)瓶中分別加入等量的化學物質甲、乙，并將培養(yǎng)瓶搖勻；C瓶不作處理，作為對照（2分）

③把3個培養(yǎng)瓶放在37℃（或適宜溫度）的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng) （2分）

（3）②龍膽紫溶液

（4）小白鼠正常體細胞有絲分裂高倍顯微鏡照片

Ⅵ．甲、乙兩種化學物質均有一定毒性，且乙的毒性比甲的毒性大（2分）

【解析】

試題分析：Ⅲ．將有毒物質加入細胞培養(yǎng)液后，培養(yǎng)的動物細胞會發(fā)生染色體數(shù)量和結構變異，在顯微鏡下可觀察、統(tǒng)計這些變異，根據(jù)這些變異細胞占全部培養(yǎng)細胞的百分數(shù)（以下稱Q值），可判斷該化學物質的毒性。

Ⅳ（2）實驗的自變量是化學物質甲或乙的有無，溫度、細胞懸液的量、甲或乙物質的量等為無關變量。根據(jù)實驗結果可判斷A、B兩個培養(yǎng)瓶中分別加入等量的化學物質甲、乙， C瓶不作處理，作為對照。

（3）②觀察染色體可以用龍膽紫溶液染色。

（4）與小白鼠正常體細胞有絲分裂高倍顯微鏡照片進行對比，可以看出發(fā)生染色體變異的細胞。

Ⅵ．根據(jù)表中數(shù)據(jù)可以看出，A、B瓶中變異細胞比例高于C瓶，且B瓶中變異細胞比例最高，說明甲、乙兩種化學物質均有一定毒性，且乙的毒性比甲的毒性大。

考點:本題主要考查動物細胞培養(yǎng)，考查實驗的設計與分析能力。