Question

1．如圖表示PCR技術(shù)的部分示意圖，其中字母代表物質(zhì)或結(jié)構(gòu)，數(shù)字代表過程．請回答相關(guān)問題：
（1）獲得A的方法有DNA的復(fù)制、PCR（請寫出兩種）．B、C代表引物，B與C之間一般不能（填“能”或“不能”）進行準確的堿基互補配對．
（2）PCR技術(shù)中，①過程發(fā)生的條件是溫度達到95℃．
（3）在②之前加入的物質(zhì)，除四種游離的脫氧核苷酸之外，還應(yīng)包括耐高溫的DNA聚合酶和DNA 連接酶．
（4）利用PCR技術(shù)擴增的目的基因，如果要導(dǎo)入植物細胞，還需要構(gòu)建基因表達的載體，最常用的導(dǎo)入方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．

Answer 1

分析 PCR技術(shù)：
（1）概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應(yīng)，是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)．
（2）原理：DNA復(fù)制．
（3）前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物．
（4）條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）
（5）過程：高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開）；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補鏈DNA上；中溫延伸：合成子鏈．

解答 解：（1）圖中A是DNA，獲得DNA的方法主要有復(fù)制和PCR．B、C表示引物，PCR中，兩種引物一般不能進行準確的堿基互補配對．
（2）①表示變性，PCR技術(shù)中，當(dāng)溫度達到95℃時，雙鏈的DNA 會解旋為單鏈的脫氧核苷酸鏈．
（3）②是延伸，所需要的原料包括四種游離的脫氧核苷酸、耐高溫的DNA聚合酶和DNA 連接酶、
（4）將目的基因?qū)�入植物細胞，還需要構(gòu)建基因表達載體，常用的導(dǎo)入方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．
故答案為：
（1）DNA的復(fù)制、PCR   引物   不能
（2）溫度達到95℃
（3）耐高溫的DNA聚合酶和DNA 連接酶
（4）基因表達的載體    農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法

點評 本題考查PCR的相關(guān)知識，要求考生識記PCR的操作工具及具體的操作步驟，掌握各步驟中的相關(guān)細節(jié)，能結(jié)合題中信息準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．