Question

【題目】科研人員利用胚胎干細胞對干擾素基因缺失小鼠進行基因治療，其技術流程如圖。請回答下列問題：

（1）過程①獲得重組胚胎之前需要通過____________技術獲得重組細胞，接受細胞核的卵母細胞應處于_______時期，并用微型吸管吸出其細胞核。

（2）步驟②中，重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時，可從其__________分離出ES細胞，ES細胞在形態(tài)上表現(xiàn)為細胞核大、核仁明顯，在功能上具有__________________。

（3）步驟③中，需要構建含干擾素基因的______，構建之前可以利用______技術對目的基因進行擴增。

（4）步驟③中將基因導入ES細胞的方法通常是____________法，為了檢測ES細胞的DNA上是否插入了干擾素基因，可采用____________________技術。

Answer 1

【答案】 核移植 MⅡ 內(nèi)細胞團 發(fā)育的全能性 （基因）表達載體 PCR 顯微注射 DNA分子雜交

【解析】【試題分析】

本題結合利用胚胎干細胞（ES細胞）對干擾素基因缺失小鼠進行基因治療的流程圖，綜合考查基因工程、細胞工程和胚胎工程的相關知識，要求考生識記基因工程和細胞工程的操作步驟及相關細節(jié)；識記核移植技術的過程及應用；識記胚胎干細胞的來源及特點，能結合所學的知識準確答題。分析題圖：圖示為利用胚胎干細胞（ES細胞）對干擾素基因缺失小鼠進行基因治療的流程，其中①表示獲得重組胚胎的過程；②表示早期胚胎培養(yǎng)過程；③表示采用基因工程技術將目的基因導入受體細胞。

（1）分析圖形可知，圖中過程①是體細胞核移植，在獲得重組胚胎之前需要通過核移植技術獲得重組細胞；接受細胞核的卵母細胞應處于MⅡ時期，并用微型吸管吸出其細胞核。

（2）步驟②是早期胚胎培養(yǎng)，重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時，可從其內(nèi)細胞團分離出ES細胞；ES細胞在形態(tài)上表現(xiàn)為細胞核大、核仁明顯，在功能上具有發(fā)育的全能性。

（3）步驟③是目的基因導入受體細胞的過程，需要構建含干擾素基因的（基因）表達載體；構建之前可以利用PCR技術對目的基因進行擴增。

（4）步驟③中將基因導入ES細胞的方法通常是顯微注射法；為了檢測ES細胞的DNA上是否插入了干擾素基因，可采用DNA分子雜交技術，若檢測出雜交帶，則說明ES細胞的DNA上插入了干擾素基因。