Question

【題目】為擴大可耕地面積，增加糧食產(chǎn)量，黃河三角洲等鹽堿地的開發(fā)利用備受關(guān)注。我國科學家應 用耐鹽基因培育出了耐鹽水稻新品系。

（1）獲得耐鹽基因后，構(gòu)建基因表達載體所用的酶有：_____

（2）將基因表達載體導入水稻受體細胞的常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和_____法。

（3）由導入目的基因的水稻細胞培養(yǎng)成植株需要利用__________技術(shù)。

（4）為了確定耐鹽轉(zhuǎn)基因水稻是否培育成功，首先可采用_____技術(shù)，即用放射性同位素標記的目的基因作探針進行分子雜交檢測。

Answer 1

【答案】 限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）和 DNA 連接酶 基因槍(花粉管通道) 植物組織培養(yǎng) DNA 分子雜交

【解析】試題分析：基因工程操作步驟包括目的基因的獲取、構(gòu)建基因表達載體、將目的基因?qū)�入受體細胞、目的基因的檢測與鑒定。將植物細胞培育成植株需利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，原理是植物細胞的全能性。

（1）構(gòu)建基因表達載體用到的酶有限制酶和DNA連接酶。先用限制酶切割含目的基因的DNA片段和載體，然后用DNA連接酶連接兩片段形成基因表達載體。（2）將基因表達載體導入水稻受體細胞的常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和基因槍法（或花粉管通道法）。（3）由水稻細胞培育成植株需利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)。（4）判斷耐鹽轉(zhuǎn)基因水稻是否培育成功，首先利用DNA分子雜交技術(shù)檢測耐鹽是否整合到水稻細胞的染色體DNA上，再利用分子雜交技術(shù)檢測耐鹽基因是否轉(zhuǎn)錄形成mRNA，最后利用抗原抗體雜交技術(shù)檢測耐鹽基因是否翻譯出相應的蛋白質(zhì)。