Question

【題目】植物在培養(yǎng)過(guò)程中容易被病毒感染，且病毒的DNA隨細(xì)胞的分裂而復(fù)制。莖尖分生區(qū)細(xì)胞一般來(lái)說(shuō)不含病毒，莖尖培養(yǎng)脫毒法已經(jīng)成為植物無(wú)毒苗生產(chǎn)中應(yīng)用最廣泛的一種方法。請(qǐng)回答下列有關(guān)脫毒苗培育和檢測(cè)的相關(guān)問(wèn)題：

（1）利用莖尖培養(yǎng)脫毒苗依據(jù)的生物學(xué)原理是______________，培養(yǎng)過(guò)程中，培養(yǎng)基中需要加入的植物激素有_____________。植物莖尖分生區(qū)細(xì)胞一般不含病毒，原因可能是__________________。

（2）RT–PCR技術(shù)以mRNA為模板合成cDNA，再進(jìn)行PCR擴(kuò)增，可用于檢測(cè)植物病毒。利用mRNA合成cDNA時(shí)，反應(yīng)體系中需要加入的原料是_________；加入RNA酶抑制劑，目的是_________。PCR過(guò)程中除了加入DNA模板外，還需要加入合成的短序列的DNA單鏈作為_________。

（3）可以用單克隆抗體檢測(cè)脫毒苗是否含有病毒，制備單克隆抗體時(shí)要先用病毒的抗原多次免疫小鼠，再提取小鼠的_________兩種細(xì)胞進(jìn)行融合。單克隆抗體用于檢測(cè)植物病毒的突出優(yōu)點(diǎn)是_________。

Answer 1

【答案】植物細(xì)胞的全能性 生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素 莖尖分生區(qū)細(xì)胞的分裂速度比病毒的復(fù)制速度快 4種脫氧核苷酸 防止mRNA被RNA酶催化水解 引物 B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞 特異性強(qiáng)、靈敏度高

【解析】

1、植物組織培養(yǎng)過(guò)程是：離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織，然后再分化生成根、芽，最終形成植物體。植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性。

2、植物組織培養(yǎng)過(guò)程中培養(yǎng)基中添加的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的作用是啟動(dòng)細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂，誘導(dǎo)離體的組織或細(xì)胞經(jīng)過(guò)脫分化形成愈傷組織，再經(jīng)過(guò)再分化形成幼苗。

3、單克隆抗體的特異性強(qiáng)，針對(duì)性更高，靈敏度高，產(chǎn)量也大大高于血清抗體。

（1）利用植物莖尖培養(yǎng)脫毒苗使用的技術(shù)是植物組織培養(yǎng)，植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性。植物組織培養(yǎng)過(guò)程中需要加入的激素是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素。根據(jù)題意可知，病毒的DNA隨細(xì)胞的分裂而復(fù)制，莖尖分生區(qū)細(xì)胞的分裂速度比病毒的復(fù)制速度快，所以莖尖分生區(qū)細(xì)胞一般來(lái)說(shuō)不含病毒。

（2）提取mRNA合成cDNA是逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程，需要逆轉(zhuǎn)錄酶和4種脫氧核苷酸；加人RNA酶抑制劑能防止mRNA被RNA酶催化水解。PCR過(guò)程中加入的短序列的DNA單鏈作為引物，以便擴(kuò)增目的基因。

（3）單克隆抗體培養(yǎng)時(shí)應(yīng)選擇B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，單克隆抗體用于檢測(cè)植物病毒的突出優(yōu)點(diǎn)在于特異性強(qiáng)、靈敏度高。