Question

 請回答下列有關(guān)基因工程的問題：

（1）如果用某種生物發(fā)育的某個時期的mRNA反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的          片段，與載體連接后儲存在一個受體菌群中，這個受體菌群體就叫做這種生物的           。

（2）目的基因進入受體細胞內(nèi)，并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程，稱為        。將目的基因?qū)�入植物細胞采用最多的方法�?u>         法。轉(zhuǎn)基因動物中采用最多，也是最為有效的一種將目的基因?qū)�入動物細胞的方法�?u>        。大腸桿菌最常用的轉(zhuǎn)化方法是：首先用Ca²⁺處理細胞，使細胞處于一種              的生理狀態(tài)，這種狀態(tài)的細胞被稱作感受態(tài)細胞。然后將重組表達載體DNA溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合，在一定的溫度條件下促進                       ，完成轉(zhuǎn)化過程。

（3）目的基因?qū)�入受體細胞后，是否可以穩(wěn)定維持和表達其遺傳特性，只有通過檢測與鑒定才能知道。首先，要檢測轉(zhuǎn)基因生物        上是否插入了目的基因。其次，還需要檢測目的基因是否          。最后檢測目的基因是否           。

(4)利用PCR技術(shù)擴增目的基因，其原理與細胞內(nèi)DNA復(fù)制類似。PCR反應(yīng)體系中含有熱穩(wěn)定DNA聚合酶，下面的表達式不能正確反映DNA聚合酶的功能，這是因為        

                                                                             。

(5)用限制酶EcoRV、Mbol單獨或聯(lián)合切割同一種質(zhì)粒，得到的DNA片段長度如下圖(1 kb

  即1000個堿基對)，請在下圖質(zhì)粒上畫出EcoRV、Mbol的切割位點。

（6）基因工程中使用的限制酶，其特點是                                          。

Answer 1

（1）多種互補DNA     cDNA（部分基因）文庫

（2）轉(zhuǎn)化     農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化    顯微注射技術(shù)

     能吸收環(huán)境中DNA   感受態(tài)細胞吸收DNA

（3）染色體的DNA   轉(zhuǎn)錄出了mRNA   翻譯成蛋白質(zhì)

(4) DNA聚合酶只能將單個脫氧核苷酸連  續(xù)結(jié)合到雙鏈DNA片段的引物鏈上

(5)見右圖

（6）特異性地識別和切割DNA