Question

7．野生酵母菌雖可以利用多種碳源，但對(duì)淀粉的利用率較低，因此有科學(xué)家將其他生物的ɑ-淀粉酶基因?qū)�入野生酵母中以獲得工程酵母，回答下列問題：
（1）以酵母菌為受體細(xì)胞時(shí)，適于用作基因工程運(yùn)載體的是質(zhì)粒．
（2）野生酵母菌可以將淀粉水解為麥芽糖和葡萄糖，這一過程發(fā)生在酵母菌細(xì)胞外（填“細(xì)胞外”或“細(xì)胞內(nèi)”）．
（3）將ɑ-淀粉酶基因?qū)�入野生酵母后，由于�?dǎo)入成功率不高，可以將這些酵母菌進(jìn)行梯度稀釋后涂布于含有剛果紅的鑒別（填“選擇”或“鑒別”）培養(yǎng)基上，透明圈大的菌落即為成功導(dǎo)入并表達(dá)目的基因的酵母菌菌落．
（4）導(dǎo)入目的基因成功的酵母菌菌種可以置于液體（填“固體”或“液體”）培養(yǎng)基中，在
有氧（填“有氧”或“無氧”）條件下擴(kuò)大培養(yǎng)．
（5）若要長(zhǎng)期保存優(yōu)良的工程酵母菌種，可以將酵母菌液與等量的甘油混勻，置于-20℃的條件下保存．

Answer 1

分析 1、“分子運(yùn)輸車”--載體
（1）載體具備的條件：①能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存．
②具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn)，供外源DNA片段插入．
③具有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇．
（2）最常用的載體是質(zhì)粒，它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的、獨(dú)立于細(xì)菌擬核DNA之外，并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子．
（3）其它載體：噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒
2、培養(yǎng)基按物理性質(zhì)分：

名稱	特征	功能
固體培養(yǎng)基	外觀顯固體狀態(tài)的培養(yǎng)基	主要用于微生物的分離、鑒定
液體培養(yǎng)基	呈液體狀態(tài)的培養(yǎng)基	主要用于工業(yè)生產(chǎn)

解答 解：（1）以酵母菌為受體細(xì)胞時(shí)，適于用作基因工程運(yùn)載體的是質(zhì)粒．
（2）野生酵母菌可以將淀粉水解為麥芽糖和葡萄糖，由于淀粉屬于生物大分子，不能進(jìn)入酵母菌細(xì)胞，因此酵母菌會(huì)將淀粉酶分泌到細(xì)胞外，水解淀粉．
（3）目的基因?qū)�入受體細(xì)胞后，需要對(duì)目的基因鑒定檢測(cè)和鑒定，因此可以將這些酵母菌進(jìn)行梯度稀釋后涂布于含有剛果紅的鑒別培養(yǎng)基上，透明圈大的菌落說明產(chǎn)生的淀粉酶將淀粉，即該菌落為成功導(dǎo)入并表達(dá)目的基因的酵母菌菌落．
（4）導(dǎo)入目的基因成功的酵母菌菌種可以置于液體培養(yǎng)基中，酵母菌在有氧呼吸條件下大量繁殖，即在有氧條件下擴(kuò)大培養(yǎng)．
（5）若要長(zhǎng)期保存優(yōu)良的工程酵母菌種，可以將酵母菌液與等量的甘油混勻，置于-20℃的條件下保存．
故答案為：
（1）質(zhì)粒
（2）麥芽    細(xì)胞外
（3）鑒別    透明圈大 
（4）液體    有氧
（5）甘油

點(diǎn)評(píng) 本題考查了基因工程和微生物分離和培養(yǎng)的有關(guān)知識(shí)，要求考生掌握基因工程的原理、工具以及操作步驟等，掌握培養(yǎng)基的類型以及微生物保存的方法等．