Question

16．為從土壤中篩選能有效降解有機化合物X的細菌，研究人員用化合物X、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功地篩選出能高效降解化合物X的細菌（目的菌）．下圖是從土壤中篩選出該細菌的過程示意圖，下表是分離純化的結果．請回答下列問題：
記錄項目：透明圈直徑/菌落直徑

菌落編號	1	2	3
48小時	1.6	2.8	3.0
72小時	2.2	1.2	5.0
96小時	2.3	1.2	4.2

（1）培養(yǎng)基中的有機化合物X主要為目的菌提供碳源（或氮源、碳源）等營養(yǎng)要素．從土壤中富集能有效降解有機化合物X的細菌時，應選用液體（填“固體”或“液體”）培養(yǎng)基．
（2）配制成10^-1濃度稀釋液時，用無菌移液管從富集液的上清液中吸取1mL，移人盛有9 mL無菌水的試管中，并依次配制10 ^-2～10 ^-10的梯度稀釋液．
（3）在分離、純化過程中，圖中②、③過程接種的方法分別為稀釋涂布平板法、平板劃線法在倒平板前，應對玻璃器皿和培養(yǎng)基滅菌，滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法．
（4）分析菌種的分離純化結果，應選擇為3號菌落進行擴大生產，原因是透明圈直徑/菌落直徑越大，降解化合物X的能力越強．
（5）實驗過程中還需配制空白培養(yǎng)基作為對照，其目的是檢驗培養(yǎng)基和平板的滅菌是否合格．

Answer 1

分析 （1）實驗室中目的菌株的篩選的原理：人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養(yǎng)、溫度．pH等），同時抑制或阻止其他微生物生長．
（2）常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法．
（3）據圖分析：①是梯度稀釋，②是稀釋涂布平板法接種，③是平板劃線法接種．

解答 解：（1）由于用化合物X、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功地篩選出能高效降解化合物X的細菌（目地菌），所以該培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基．由于微生物的生長需要水、無機鹽、碳源、氮源和生長因子，所以化合X為目的菌提供碳源和氮源等營養(yǎng)要素．從土壤中富集能有效降解有機化合物X的細菌時，應選用液體培養(yǎng)基．
（2）進行梯度稀釋時，配制成10^-1濃度稀釋液時，用無菌移液管從富集液的上清液中吸取1mL，移入盛有9mL無菌水的試管中，并依次配制10 ^-2～10 ^-10的梯度稀釋液．
（3）據圖分析，②的菌落均勻是稀釋涂布平板法接種，③的平板上有明顯的劃痕是平板劃線法接種．對玻璃器皿和培養(yǎng)基滅菌需要使用高壓蒸汽滅菌法滅菌．
（4）據表分析，3號菌落的透明圈直徑/菌落直徑最大，降解化合物X的能力最強，所以應該使用3號菌落進行擴大生產．
（5）實驗中空白培養(yǎng)基培養(yǎng)的目的是作為對照實驗，以檢驗培養(yǎng)基和平板的滅菌是否合格．
故答案為：
（1）碳源（或氮源、碳源）   液體
（2）9
（3）稀釋涂布平板法、平板劃線法    高壓蒸汽滅菌法
（4）3   透明圈直徑/菌落直徑越大，降解化合物X的能力越強
（5）檢驗培養(yǎng)基和平板的滅菌是否合格

點評 本題的知識點是選擇培養(yǎng)基的選擇作用，目的菌的篩選、微生物的培養(yǎng)等知識，主要考查學生運用微生物培養(yǎng)的知識解決生活中問題的能力．