Question

1．如圖表示基因工程中基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，據(jù)圖分析下列問題．
（1）從圖中可看出，切割質(zhì)粒和目的基因的限制酶是EcoRⅠ限制酶．
（2）插入的目的基因只是結(jié)構(gòu)基因部分，其表達(dá)還需要調(diào)控序列，因而用作載體的質(zhì)粒插入部位前須有啟動(dòng)子，后須有終止子．
（3）在圖中右邊的方框內(nèi)畫出甲、乙拼接后形成的重組質(zhì)粒．

Answer 1

分析 基因工程又叫基因拼接技術(shù)，一般要先將目的基因與運(yùn)載體結(jié)合，然后導(dǎo)入受體細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)．
用到的工具有限制性核酸內(nèi)切酶--“分子手術(shù)刀”、DNA連接酶--“分子縫合針”、基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體--“分子運(yùn)輸車”．
基因表達(dá)載體的組成：目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因．
1、啟動(dòng)子在基因的首段，它是RNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn)，能控制著轉(zhuǎn)錄的開始；
2、終止子在基因的尾端，它控制著轉(zhuǎn)錄的結(jié)束；
3、標(biāo)記基因便于目的基因的鑒定和篩選．

解答 解：（1）限制酶EcoRⅠ的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)分別是-G↓AATTC-，因此圖中切割質(zhì)粒和目的基因的限制酶是EcoRⅠ限制酶．
（2）啟動(dòng)子在基因的首段，它是RNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn)，能控制著轉(zhuǎn)錄的開始；終止子在基因的尾端，它控制著轉(zhuǎn)錄的結(jié)束，因此載體中目的基因插入部位的前端須有啟動(dòng)子，后端須有終止子．
（3）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)只需要利用DNA連接酶將圖中的甲和乙黏性末端連接形成環(huán)狀即可，答案見下圖．
故答案為：
（1）EcoRⅠ限制酶
（2）啟動(dòng)子 終止子
（3）

點(diǎn)評(píng) 本題比較基礎(chǔ)，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及技術(shù)，掌握基因工程的操作步驟及各步驟中的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記層次的考查．