Question

8．我國首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬在東北農(nóng)業(yè)大學(xué)的種豬場自然分娩產(chǎn)出，這標志著我國在轉(zhuǎn)基因克隆豬技術(shù)領(lǐng)域已達到世界領(lǐng)先水平．如圖為我國首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖，請據(jù)圖回答：
（1）一個完整的基因表達載體除了帶有綠色熒光蛋白基因以外，還必須含有復(fù)制原點、啟動子、終止子和標記基因．啟動子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，它是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位；而起始密碼子的化學(xué)本質(zhì)則是RNA（DNA或RNA）．
（2）過程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細胞后，要通過DNA分子雜交技術(shù)，來檢測綠色熒光蛋白基因是否已重組到豬胎兒成纖維細胞的染色體DNA上．
（3）從豬中取胎兒成纖維細胞，用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）處理，然后進行分散培養(yǎng)．培養(yǎng)時，將培養(yǎng)瓶置于含一定量CO₂的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)，CO₂的作用是維持培養(yǎng)液的pH．
（4）過程④表示通過顯微操作法吸出卵母細胞中的細胞核，微型吸管除了將細胞核吸除外，往往還要將第一極體一并吸出．
（5）本實驗所用到的現(xiàn)代生物科學(xué)技術(shù)有ABD（填序號）．
A．動物細胞培養(yǎng)                       B．胚胎移植
C．胚胎細胞核移植                     D．DNA重組技術(shù)．

Answer 1

分析 據(jù)圖分析，①表示獲取綠色熒光蛋白基因，②表示基因表達載體的構(gòu)建，③表示將目的基因?qū)�入受體細胞，④表示對卵母細胞去核，⑤表示細胞核移植獲得重組細胞，⑥表示早期胚胎的培養(yǎng)，⑦表示胚胎移植，⑧表示克隆豬的分娩．

解答 解：（1）一個完整的基因表達載體除了帶有綠色熒光蛋白基因以外，還必須含有復(fù)制原點、啟動子、終止子和標記基因．啟動子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，它是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位；而起始密碼子位于mRNA上，即化學(xué)本質(zhì)是RNA．
（2）目的基因（綠色熒光蛋白基因）是否已重組到豬胎兒成纖維細胞的染色體上，可用DNA分子雜交技術(shù)進行檢測．
（3）從豬中取胎兒成纖維細胞進行動物細胞培養(yǎng)，需要用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）處理獲得單個細胞，然后進行分散培養(yǎng)．培養(yǎng)時，將培養(yǎng)瓶置于含一定量CO₂的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)，CO₂的作用是維持培養(yǎng)液的pH．
（4）過程④表示通過顯微操作法吸出卵母細胞中的細胞核，微型吸管除了將細胞核吸除外，往往還要將第一極體一并吸出．
（5）A、分析圖解可知，需要對成纖維細胞進行動物細胞培養(yǎng)，A正確；
B、早期胚胎需要經(jīng)過胚胎移植移植到受體母豬體內(nèi)，B正確；
C、過程中進行了成纖維細胞進行細胞核移植，C錯誤；
D、該過程屬于基因工程，又稱為DNA重組技術(shù)，D正確．
故答案為：
（1）標記基因        RNA聚合       RNA
（2）染色體DNA
（3）胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）     維持培養(yǎng)液的pH
（4）第一極體
（5）ABD

點評 本題結(jié)合圖解，考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理、工具及操作步驟，能準確判斷圖中各過程的含義，再結(jié)合圖中信息準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．