Question

【題目】回答下列（一）、（二）兩小題

（一）大腸桿菌是生存在人體腸道中的正常菌群，每克糞便中含有109個(gè)，且能夠與致病菌混雜生長(zhǎng)。如果食品和飲用水中出現(xiàn)大腸桿菌，就意味著食物可能被糞便污染而帶上致病菌，因而常將大腸桿菌的數(shù)量作為食品衛(wèi)生的檢測(cè)指標(biāo)之一。請(qǐng)據(jù)此回答下列問(wèn)題：

（1）大腸桿菌異化作用的類型是________，大腸桿菌在腸道中一般對(duì)人無(wú)害，但如果進(jìn)入人的___________，就會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生危害。

（2）測(cè)定街邊出售的奶茶中大腸桿菌的數(shù)目，常用涂布分離法進(jìn)行測(cè)定。在操作過(guò)程中錯(cuò)誤的是_______

A．將涂布器從70%酒精中取出后需放在酒精燈火焰上灼燒

B．涂布時(shí)需轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿以使涂布均勻

C．每一濃度需設(shè)多個(gè)培養(yǎng)皿進(jìn)行涂布

D．也可以利用劃線分離法進(jìn)行測(cè)定

（3）根據(jù)菌落測(cè)出的大腸桿菌數(shù)比實(shí)際數(shù)值要___(高、低)，原因是___________________。實(shí)驗(yàn)完成后需要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行_________處理，然后才能倒掉。

（二）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程是：

組織→單個(gè)細(xì)胞的懸浮液→原代培養(yǎng)→傳代培養(yǎng)

（1）此過(guò)程的原理是_____________，將培養(yǎng)瓶放入____________培養(yǎng)。

（2）培養(yǎng)的條件除了充足的營(yíng)養(yǎng)供給、適宜的溫度和氣體環(huán)境，還有____________。在培養(yǎng)的過(guò)程中_______（需要/不需要）再用胰蛋白酶。

（3）傳代培養(yǎng)得到的細(xì)胞系具有_______性。關(guān)于細(xì)胞系和細(xì)胞株下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是______

A．原代培養(yǎng)得到的細(xì)胞也可以是細(xì)胞系

B．細(xì)胞系是具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞株

C．連續(xù)細(xì)胞系都獲得了不死性

D．連續(xù)細(xì)胞系不一定都發(fā)生了轉(zhuǎn)化

Answer 1

【答案】兼性厭氧型 泌尿系統(tǒng) D 低 培養(yǎng)基中可能有兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌緊挨在一起，共同形成一個(gè)菌落 滅菌 細(xì)胞增殖 二氧化碳培養(yǎng)箱 無(wú)菌、無(wú)毒 需要 異質(zhì) D

【解析】

1、常用的微生物接種方法主要有平板劃線法和稀釋涂布平板法，兩者都可以用于菌種的分離，后者還可以用于菌種的計(jì)數(shù)。

2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件：

（1）無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：①消毒、滅菌、②添加一定量的抗生素、③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物。
（2）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)。
（3）適宜的溫度和PH。
（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的PH）。
3、細(xì)胞株：原代培養(yǎng)細(xì)胞傳至10代左右就不容易傳下去，細(xì)胞生長(zhǎng)停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡，少數(shù)細(xì)胞能存活傳到40～50代，這部分細(xì)胞稱為細(xì)胞株。細(xì)胞系：細(xì)胞株傳到50代左右不能再繼續(xù)傳代，部分細(xì)胞遺傳物質(zhì)改變，具有癌變細(xì)胞的特點(diǎn)，可以在培養(yǎng)條件下無(wú)限制的傳代下去，這部分細(xì)胞稱為細(xì)胞系。

（一）（1）人體的腸道是一個(gè)無(wú)氧環(huán)境，大腸桿菌可在人體的腸道內(nèi)生存，也能在食品和飲用水中出現(xiàn)，說(shuō)明大腸桿菌的異化作用類型為兼性厭氧型。大腸桿菌在腸道中一般對(duì)人無(wú)害，但如果進(jìn)入人的泌尿系統(tǒng)，就會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生危害。

（2）A、涂布器滅菌時(shí)，將涂布器從70%酒精中取出后在火焰上引燃待酒精燃盡后，然后在酒精燈火焰旁冷卻8～10s再用，A正確；

B、涂布時(shí)，涂布器可以不動(dòng)，可轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿，使涂布均勻，B正確；

C、每一濃度需設(shè)多個(gè)培養(yǎng)皿進(jìn)行涂布，最后求多個(gè)培養(yǎng)皿上菌落的平均值，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更準(zhǔn)確，C正確；

D、劃線分離法不能用于計(jì)數(shù)，D錯(cuò)誤。

故選D。

（3）由于培養(yǎng)基中可能有兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌緊挨在一起，共同形成一個(gè)菌落，所以根據(jù)菌落測(cè)出的大腸桿菌數(shù)比實(shí)際數(shù)值要低。實(shí)驗(yàn)完成后需要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌處理，然后才能倒掉，以防止微生物污染環(huán)境。

（二）（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞的增殖。二氧化碳培養(yǎng)箱是通過(guò)在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成一個(gè)類似細(xì)胞/組織在生物體內(nèi)的生長(zhǎng)環(huán)境，所以動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需將培養(yǎng)瓶放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

（2）培養(yǎng)的條件除了充足的營(yíng)養(yǎng)供給、適宜的溫度和氣體環(huán)境，還有無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境。由于細(xì)胞增殖過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)接觸抑制，所以在培養(yǎng)的過(guò)程中還需要再用胰蛋白酶處理，使組織細(xì)胞分散開(kāi)。

（3）傳代培養(yǎng)的細(xì)胞會(huì)發(fā)生變異，具有異質(zhì)性。

A、動(dòng)物組織經(jīng)過(guò)機(jī)械消化或胰蛋白酶消化，可分散成單個(gè)的細(xì)胞；在細(xì)胞培養(yǎng)中，有原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)之分，傳代培養(yǎng)得到的連續(xù)細(xì)胞系大多數(shù)具有異倍體核型，原代培養(yǎng)物在首次傳代時(shí)就成為細(xì)胞系，A正確；

B、通過(guò)一定的選擇或純化方法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞株中獲得的具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞稱為細(xì)胞系，B正確；

C、能連續(xù)培養(yǎng)下去的細(xì)胞系稱為連續(xù)細(xì)胞系，其獲得了不死性，C正確；

D、連續(xù)細(xì)胞系被認(rèn)為是發(fā)生了轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系，D錯(cuò)誤。

故選D。