Question

13．浙江大學(xué)農(nóng)學(xué)院喻景權(quán)教授課題組研究發(fā)現(xiàn)，一種植物激素--油菜素內(nèi)酯能促進(jìn)農(nóng)藥在植物體內(nèi)的降解和代謝．用油菜素內(nèi)酯處理后，許多參與農(nóng)藥降解的基因（如P450基因和紅霉素抗性基因）表達(dá)和酶活性都得到提高，在這些基因“指導(dǎo)”下合成的蛋白酶能把農(nóng)藥逐漸轉(zhuǎn)化為水溶性物質(zhì)或低毒甚至無毒物質(zhì)，有的則被直接排出體外．某課題組進(jìn)一步進(jìn)行了如下的實驗操作，請回答下列問題．

（1）步驟①用PCR技術(shù)擴(kuò)增基因時用到的耐高溫酶通常是指熱穩(wěn)定DNA聚合酶（或Taq酶）；步驟②用到的酶有限制酶和DNA連接酶．
（2）圖中導(dǎo)入重組質(zhì)粒的方法是轉(zhuǎn)化法，在導(dǎo)入之前應(yīng)用氯化鈣溶液處理受體細(xì)菌．
（3）PCR技術(shù)的原理是DNA的復(fù)制（或DNA分子的復(fù)制）；在培養(yǎng)基中加入紅霉素可將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來．

Answer 1

分析 分析題圖：圖中①表示采用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，③表示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，④⑤表示篩選過程．

解答 解：（1）PCR技術(shù)擴(kuò)增基因時用到的耐高溫酶通常是指熱穩(wěn)定DNA聚合酶（或Taq酶）；②為基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，該過程首先要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA和運載體，其次需要用DNA連接酶將目的基因與運載體連接形成重組DNA．
（2）圖中受體細(xì)胞是微生物細(xì)胞，將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，即用氯化鈣溶液處理受體細(xì)菌，使之成為易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)．
（3）PCR技術(shù)的原理是DNA的復(fù)制（或DNA分子的復(fù)制）；由圖可知，抗性基因是紅霉素基因，因此在培養(yǎng)基中加入紅霉素可將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來．
故答案為：
（1）熱穩(wěn)定DNA聚合酶（或Taq酶）　限制酶和DNA連接酶　
（2）轉(zhuǎn)化法　氯化鈣溶液
（3）DNA的復(fù)制（或DNA分子的復(fù)制）　紅霉素

點評 本題結(jié)合圖解，考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題．