Question

在培育轉基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作為標記基因，只有含卡那霉素抗性基因的細胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長．下圖為獲得抗蟲棉的技術流程．

請據(jù)圖回答：
（1）A過程需要的酶有

 

．
（2）B過程及其結果體現(xiàn)了質粒作為運載體必須具備的兩個條件是

 

和

 

．
（3）C過程的培養(yǎng)基除含有必要營養(yǎng)物質、瓊脂和激素外，還必須加入

 

．
（4）如果利用DNA分子雜交原理對再生植株進行檢測，D過程應該用

 

作為探針．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術

專題：

分析：分析題圖：圖示表示獲得抗蟲棉的技術流程圖，首先采用基因工程技術將抗蟲基因導入離體棉花葉片組織，其過程為：獲取目的基因（抗蟲基因）→構建基因表達載體→將目的基因導入農桿菌→用含有卡那霉素的選擇培養(yǎng)基篩選含有重組質粒的土壤農桿菌→利用農桿菌轉化法將目的基因導入離體棉花葉片組織細胞．其次采用植物組織培養(yǎng)技術，將導入抗蟲基因的細胞培養(yǎng)成轉基因抗蟲植株，其過程主要包括脫分化和再分化兩個步驟．

解答： 解：（1）圖中A為基因表達載體的構建過程，該過程首先需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和運載體，還需DNA連接酶將目的基因和運載體連接形成重組質粒．
（2）B過程是培養(yǎng)并選擇含有重組質粒的土壤農桿菌，其中“選擇”體現(xiàn)了質粒作為運載體必須具備具有標記基因；“培養(yǎng)”體現(xiàn)了質粒作為運載體必須能在宿主細胞中復制并穩(wěn)定保存．
（3）由圖可知，標記基因是卡那霉素抗性基因，因此要在培養(yǎng)基中添加卡那霉素．
（4）如果要檢測轉基因是否成功，D過程最好采用放射性同位素標記的抗蟲基因作為探針，利用DNA分子雜交原理進行檢測．
故答案為：
（1）限制性內切酶和DNA連接酶     
（2）具有標記基因    能在宿主細胞中復制并穩(wěn)定保存   
（3）卡那霉素  
（4）放射性同位素（或熒光分子）標記的抗蟲基因

點評：本題結合轉基因抗蟲植株的培育過程圖，考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的工具及操作步驟，能準確判斷圖中各過程的名稱；識記質粒作為運載體的條件；掌握目的基因檢測與鑒定的方法等．