Question

18．牛奶是微生物生長的良好培養(yǎng)基．生鮮牛奶中的微生物情況反映了奶牛的健康狀況，也影響奶制品的運(yùn)輸和貯藏．牛奶在飲用前都要經(jīng)過巴氏消毒，以殺死有害微生物．為檢測(cè)消毒前后牛奶中細(xì)菌含量變化情況，做如圖1所示操作．用無菌吸管從錐形瓶中吸取1mL生牛奶稀釋液至盛有9mL無菌水的試管中，混合均勻，如此再重復(fù)2次．請(qǐng)回答下列有關(guān)問題：

（1）利用巴氏消毒法對(duì)生鮮牛奶進(jìn)行消毒的好處是牛奶的營養(yǎng)成分不被破壞．
（2）取最終的牛奶稀釋液0.1mL滴在培養(yǎng)基上進(jìn)行涂布，應(yīng)選擇的涂布工具是下圖2中的B．
（3）圖中所示方法為稀釋培養(yǎng)法，理想情況下，培養(yǎng)一段時(shí)間后可在培養(yǎng)基表面形成菌落．若用該方法培養(yǎng)設(shè)置了3個(gè)培養(yǎng)皿，菌落數(shù)分別為35個(gè)、33個(gè)、34個(gè)，則可以推測(cè)生牛奶中每毫升含細(xì)菌數(shù)為3.4×10⁶個(gè)．運(yùn)用這種方法統(tǒng)計(jì)的結(jié)果往往較實(shí)際值偏�。ㄌ睢捌�大”或“偏小”），原因是個(gè)別菌落可能是由2個(gè)或多個(gè)細(xì)菌形成．
（4）消毒后的牛奶中絕大部分細(xì)菌被殺死，若繼續(xù)用該方法檢測(cè)消毒后的牛奶中細(xì)菌的數(shù)量，則在操作步驟上應(yīng)做什么改動(dòng)？稀釋次數(shù)減少．
（5）從生牛奶取樣培養(yǎng)得到的菌落中，混有各種雜菌，從中檢測(cè)出大腸桿菌的方法是在培養(yǎng)基中加入伊紅美藍(lán)，菌落具有（金屬光澤的紫）黑色特征的可以認(rèn)定為大腸桿菌．

Answer 1

分析 圖1為稀釋涂布平板法，圖2中A為接種環(huán)，B為涂布器，C為滴管，D為接種針．
滅菌是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所用的微生物（包括芽孢和孢子），常用的方法主要有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌，適用對(duì)象主要有接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等．消毒是指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包芽孢和孢子），常用的方法主要有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外線消毒法，適用對(duì)象主要有操作空間、某些液體、雙手等．稀釋涂布平板法常用來進(jìn)行微生物的計(jì)數(shù)．

解答 解：（1）常用的消毒方法主要有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外線消毒法．巴氏消毒的方法是指70-75℃煮30分鐘或80℃煮15分鐘，使用這種方法對(duì)生鮮牛奶進(jìn)行消毒的好處是牛奶的營養(yǎng)成分不被破壞．
（2）將液體菌種接種在固體培養(yǎng)基上常用的方法主要是稀釋涂布平板法，所用的接種工具是涂布器．即圖2中的B．
（3）由于圖中稀釋了10⁴倍，牛奶中每毫升含細(xì)菌數(shù)為（35+33+34）÷3÷0.1×10⁴=3.4×10⁶個(gè)．由于經(jīng)此方法接種培養(yǎng)時(shí)當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)菌落重疊在一起時(shí)按一個(gè)菌落計(jì)算，所以運(yùn)用這種方法統(tǒng)計(jì)的結(jié)果往往較實(shí)際值偏�。�
原因是 個(gè)別菌落可能是由2個(gè)或多個(gè)細(xì)菌形成．
（4）消毒后的牛奶中絕大部分細(xì)菌被殺死，若繼續(xù)用該方法檢測(cè)消毒后的牛奶中細(xì)菌的數(shù)量，由于細(xì)菌數(shù)目減少，故應(yīng)稀釋次數(shù)減少．
（5）檢測(cè)大腸桿菌的方法是在培養(yǎng)基中加人伊紅美藍(lán)，菌落具有（金屬光澤的紫）黑色特征的可以認(rèn)定為大腸桿菌．
故答案為：
（1）牛奶的營養(yǎng)成分不被破壞
（2）B
（3）3.4×10⁶ 偏小 個(gè)別菌落可能是由2個(gè)或多個(gè)細(xì)菌形成
（4）稀釋次數(shù)減少
（5）伊紅美藍(lán) （金屬光澤的紫）黑色

點(diǎn)評(píng) 本題主要考查微生物的培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，關(guān)鍵是要求學(xué)生弄清滅菌與消毒的概念、方法、適用對(duì)象和微生物的接種與計(jì)數(shù)．