Question

5．為了分離和計數土壤中分解尿素的細菌，配制如下培養(yǎng)基進行實驗．回答下列問題：

KH2PO4	NaHPO4	MgSO4•7H2O	葡萄糖	尿素	瓊脂	H2O
1.4g	2.1g	0.2g	10.0g	1.0g	15.0g	1000mL

（1）從功能上看該培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基；尿素的作用是提供氮源；鑒定尿素是否被分解可加酚紅試劑．
（2）在實驗操作過程中，下列材料或用具：①培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿；②玻棒、試管、錐形瓶和吸管；③實驗操作者的雙手．需要滅菌的是：①和②（填序號）．
（3）實驗操作步驟中若取土樣lg，因土壤中細菌密度很大，需要不斷加以稀釋，將l0⁴～l0⁷倍的稀釋液分別吸取0.2mL加入到固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，在對應稀釋倍數為10⁶的培養(yǎng)基中統(tǒng)計3個平板上的菌落數．為保證結果準確，一般選擇菌落數為30～300的平板進行計數，若3個平板菌落數分別為219、212、256，則每克該土壤樣品中的菌株數為1.145×10⁹個．

Answer 1

分析 土壤中分解尿素的細菌的分離與計數實驗中，需要使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，計數的關鍵是經梯度稀釋后的學生倍數要合適，計數時通常選擇菌落數在30-300之間的實驗組平板進行計數．

解答 解：（1）根據題意可知，該培養(yǎng)基要分離和計數土壤中分解尿素的細菌，因此從功能上看該培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基，并且尿素應該作為該培養(yǎng)基的唯一氮源；鑒定尿素是否被分解可加酚紅試劑．
（2）①培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿和②玻棒、試管、錐形瓶和吸管，需要滅菌，而③實驗操作者的雙手需要消毒．
（3）實為保證結果準確，一般選擇菌落數為30～300的平板進行計數．在對位稀釋倍數為10⁶的培養(yǎng)基中統(tǒng)計3個平板上的菌落數分別為：219、212、256，則每克該土壤樣品中的菌株數為=（219+212+256）÷3×10⁶÷0.2=1.145×10⁹個．
故答案為：
（1）選擇    提供氮源    酚紅
（2）①和②
（3）30～300       1.145×10⁹

點評 本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關知識，要求考生能夠識記培養(yǎng)基的成分、種類以及培養(yǎng)基的制備，能夠根據表格獲取有效解題信息，難度適中．