Question

【題目】下表是某同學列出的分離土壤中微生物培養(yǎng)基的配方數(shù)據(jù)表，據(jù)此回答下列問題：

培養(yǎng)基配方	含量
KH2PO4	1.4g
Na2HPO4	2.1g
MgSO47H2O	0.2g
葡萄糖	10.0g
尿素	1.0g
瓊脂	15.0g
將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000mL

（1）培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中，一般都含有碳源、氮源、___________________等營養(yǎng)物質(zhì)。若用于培養(yǎng)乳酸菌，培養(yǎng)基中除上述營養(yǎng)物質(zhì)外，還需要添加_____________________。細菌能利用尿素作為氮源，是由于其能合成_____________________酶。

（2）在對分離的能分解尿素的細菌進行鑒定時，還需在培養(yǎng)基中加入______________指示劑。接種前一般采取_______________對培養(yǎng)基進行滅菌。

（3）某同學在4個培養(yǎng)基上分別接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣液0.1mL，培養(yǎng)后菌落數(shù)分別為161、155、158、170個，則每毫升原土壤樣液中尿素分解菌的數(shù)量為_________________。某同學在純化土壤中的尿素分解菌時，培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是__________________。

（4）常采用________________法將純化得到的目的菌長期保存。

Answer 1

【答案】 水和無機鹽 維生素 脲 酚紅 高壓蒸汽法 1.61×108 菌液濃度過高（土壤溶液稀釋不夠） 甘油管藏

【解析】試題分析：培養(yǎng)微生物時，培養(yǎng)基中需要加入碳源、氮源、無機鹽、水，還需要滿足微生物生長對pH，特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。如培養(yǎng)乳酸菌需要加入維生素，培養(yǎng)霉菌需要把pH值調(diào)到酸性等。能夠分解利用尿素的細菌，其細胞內(nèi)含有脲酶，可以把尿素分解成氨，提供N源，進一步利用，只含有尿素作為N源的培養(yǎng)基對微生物具有選擇作用。

（1）培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中，一般都含有碳源、氮源、水和無機鹽等營養(yǎng)物質(zhì)。若用于培養(yǎng)乳酸菌，培養(yǎng)基中除上述營養(yǎng)物質(zhì)外，還需要添加維生素。題干指出從土壤中分離的微生物的培養(yǎng)基，其中尿素是作為唯一氮源，說明該微生物能分泌脲酶分解尿素。

（2）能利用尿素中的氮源，以尿素為唯一氮源且含酚紅的培養(yǎng)基可以選擇和鑒別尿素分解菌。對培養(yǎng)基滅菌一般采用高壓蒸汽滅菌法。

（3）純化微生物可以用稀釋涂布法和平板劃線法，其中稀釋涂布法能用于微生物的計數(shù)。1毫升原土壤樣液中上述微生物數(shù)量=（161+158+170+155）÷4×105÷0.1=1.61×109個。若在純化土壤中的尿素分解菌時，培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是菌液濃度過高。

（4）常采用甘油管藏法將純化得到的目的菌長期保存。