Question

19．在熒光素酶中加入正確的熒光素底物就可以發(fā)熒光．熒光素酶及其合成基因在生物研究中有著廣泛的應(yīng)用．請(qǐng)回答下列問題：
（1）熒光素酶基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲�。�利用PCR技術(shù)擴(kuò)增熒光素酶基因是利用DNA復(fù)制的原理．
（2）限制酶是切割DNA的工具酶，主要從微生物中分離純化出來．下表為4中限制酶的識(shí)別序列個(gè)酶切位點(diǎn)，下圖為含有熒光素酶基因的DNA片段及其具有的限制酶切點(diǎn)．若需利用酶切法（只用一種酶）獲得熒光酶基因，最應(yīng)選擇的限制酶是Msp1．

限制酶	Msp　I	BamH　I	Mbo　I	Sma　I
酶切位點(diǎn)

Answer 1

分析 分析圖1：含有目的基因的外源DNA分子中含有限制酶BamHⅠ、SmaⅠ、MboⅠ和MspⅠ的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)，其中BamHⅠ的酶切位點(diǎn)在目的基因的中間，SmaⅠ的酶切位點(diǎn)只有一個(gè)，MboⅠ的識(shí)別序列中含有MspⅠ的識(shí)別序列，因此要獲得目的基因可用限制酶MspⅠ切割．

解答 解：（1）熒光素酶基因可以人工合成、從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增．利用PCR技術(shù)擴(kuò)增熒光素酶基因是利用DNA復(fù)制的原理．
（2）限制酶具有特異性，是切割DNA的工具酶，主要從微生物中分離純化出來．要獲得目的基因必須在目的基因的兩側(cè)相應(yīng)的酶切位點(diǎn)進(jìn)行切割，圖1中可以看出，BamHⅠ的酶切位點(diǎn)在目的基因的中間，故不可��；SmaⅠ的酶切位點(diǎn)只有一個(gè)，故不可��；根據(jù)表格可以看出，MboⅠ的識(shí)別序列中含有MspⅠ的識(shí)別序列，因此要獲得目的基因可用限制酶MspⅠ切割．
故答案為：
（1）基因文庫(kù)    DNA復(fù)制
（2）微生物    Msp1

點(diǎn)評(píng) 本題考查了基因工程的工具和步驟等知識(shí)、探究類實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力；具備驗(yàn)證簡(jiǎn)單生物學(xué)事實(shí)的能力．